首次從生物體組織分離后進(jìn)行培養(yǎng)的那批細(xì)胞群體，也就是原代細(xì)胞，于生命科學(xué)基礎(chǔ)研究以及藥物篩選等領(lǐng)域里占據(jù)著不可被替代的位置。跟永生化細(xì)胞系不一樣，原代細(xì)胞最大程度地留存了來源組織的生理特點(diǎn)與遺傳訊息，進(jìn)而能更真切地展現(xiàn)出體內(nèi)的細(xì)胞狀況。然而，這同樣表明它們對(duì)于環(huán)境變化格外敏感，操作期間的任何一點(diǎn)疏忽都極有可能致使實(shí)驗(yàn)失敗 ， 成為泡影。
為什么原代細(xì)胞總是養(yǎng)不活
這差不多是每一個(gè)頭一回接觸原代細(xì)胞的研究者都將會(huì)碰到的難題，原代細(xì)胞對(duì)生長環(huán)境特別挑，培養(yǎng)基的配方、血清的批次，就連培養(yǎng)皿的表面處理都會(huì)明顯影響其貼壁以及增殖能力，更關(guān)鍵的是，分離過程里的酶消化時(shí)間與力度要是把握不好，會(huì)直接損害細(xì)胞膜，致使大量細(xì)胞在接種之后24小時(shí)內(nèi)死掉，細(xì)胞來源個(gè)體的年齡、健康狀況以及取樣之后的處理時(shí)效性，都是決定細(xì)胞活性的關(guān)鍵因素。
原代細(xì)胞和細(xì)胞系到底怎么選
這得看你做實(shí)驗(yàn)的目的是啥。要是研究的目標(biāo)是去探究藥物在跟真實(shí)生理環(huán)境比較接近的情況下細(xì)胞的反應(yīng)，那原代細(xì)胞絕對(duì)是更好的選擇，為啥呢，因?yàn)樗鼈儼褋碓唇M織的信號(hào)通路還有代謝特征給保留下來了。不過細(xì)胞系有均一性比較好、增殖能力很強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性比較高這樣的優(yōu)點(diǎn)。要是你的實(shí)驗(yàn)需要長時(shí)間進(jìn)行觀察或者大規(guī)模地去篩選，那細(xì)胞系更合適；而要是涉及個(gè)體差異以及組織特異性功能的研究，那就必須得選原代細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)前必須確認(rèn)的三個(gè)關(guān)鍵
查證細(xì)胞來源的合法性以及檢測(cè)報(bào)告，從而保證不存在細(xì)菌、真菌還有支原體污染。其次，預(yù)先備好全部培養(yǎng)基以及添加劑，鑒于原代細(xì)胞對(duì)饑餓以及溫度變化特別敏感，在操作之前需把培養(yǎng)基放進(jìn)培養(yǎng)箱中預(yù)平衡最少1小時(shí)。再者，算清楚所需細(xì)胞數(shù)量，由于原代細(xì)胞傳代次數(shù)受限，一般僅能傳3至5代，實(shí)驗(yàn)方案得依據(jù)這一特性予以優(yōu)化，防止因細(xì)胞老化致使實(shí)驗(yàn)中斷。
在著手開展原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之前，你有沒有針對(duì)那些有可能出現(xiàn)的難題，做好了充足的應(yīng)對(duì)預(yù)案呢？
