ELISA試劑盒，于生命科學(xué)基礎(chǔ)研究里，是檢測(cè)蛋白質(zhì)等靶標(biāo)分子時(shí)要常用的工具。市場(chǎng)上有著眾多品牌以及規(guī)格，怎樣從中選出穩(wěn)定又可靠的產(chǎn)品？這則將直接對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的重復(fù)性以及準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。下面會(huì)從幾個(gè)核心問題著手，去幫助科研人員理清選購思路。
如何判斷ELISA試劑盒靈敏度
能夠被試劑盒檢測(cè)到的最低靶標(biāo)濃度就是所謂的靈敏度。在進(jìn)行選購時(shí)，要先去查閱產(chǎn)品說明書里的最低檢測(cè)限數(shù)值，該數(shù)值越低就表明靈敏度是越高的。與此同時(shí)，還要關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍是不是覆蓋了你樣本預(yù)期濃度區(qū)間。建議去參考同領(lǐng)域已發(fā)表文獻(xiàn)里所使用的試劑盒信息，或者向供應(yīng)商索取批次質(zhì)檢報(bào)告，以此來對(duì)比不同產(chǎn)品的靈敏度指標(biāo)。
試劑盒穩(wěn)定性怎么看
其穩(wěn)定性關(guān)聯(lián)關(guān)乎 reagents 在運(yùn)輸以及儲(chǔ)存進(jìn)程里性能有無衰減，查看產(chǎn)品有效期限以及推薦的保存溫度，像 2 - 8℃或者 - 20℃，正規(guī)廠家會(huì)給出加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，諸如在 37℃放置若干日后回收率依舊維持在 80% - 120%，另外留意試劑盒有無附帶質(zhì)控品，以及批間差和批內(nèi)差的變異系數(shù)是否小于 10% - 15%，這些參數(shù)能夠體現(xiàn)批次間的一致程度。
不同樣本類型怎么處理
科研里常常會(huì)碰到的樣本涵蓋了細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清或者血漿之類的。每一種樣本的基質(zhì)成分是不一樣的，有可能會(huì)對(duì)抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)造成干擾。在挑選試劑盒之前，要去確認(rèn)產(chǎn)品說明書有沒有驗(yàn)證過你的樣本類型，并且查看是不是有推薦的稀釋倍數(shù)以及樣本預(yù)處理的步驟。比如說組織樣本通常需要?jiǎng)驖{之后進(jìn)行離心從而獲取上清，而細(xì)胞上清有可能可以直接使用，這些細(xì)節(jié)都需要提前進(jìn)行核對(duì)。
科研ELISA試劑盒選擇哪些指標(biāo)
除了要瞧靈敏度以及穩(wěn)定性之外，還得去關(guān)注特異性，也就是試劑盒能不能夠區(qū)分那些結(jié)構(gòu)相似的目標(biāo)分子，去查看交叉反應(yīng)列表，進(jìn)而確認(rèn)不會(huì)檢測(cè)出非靶標(biāo)蛋白。另外，操作時(shí)間其實(shí)也是實(shí)際需要考量的因素，有一些試劑盒采用預(yù)包被板以及即用型檢測(cè)液，能夠把總時(shí)長(zhǎng)控制在3小時(shí)以內(nèi)。在價(jià)格方面，不要僅僅去比單價(jià)，而是應(yīng)該計(jì)算每個(gè)反應(yīng)孔的實(shí)際成本，把試劑損耗以及重復(fù)次數(shù)囊括進(jìn)去。
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