在生命科學(xué)基礎(chǔ)研究里，會被用到、不可或缺的工具是腫瘤細(xì)胞株，它被用來探索細(xì)胞生長、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及藥物篩選等機制。正確地選擇并使用細(xì)胞株會直接去影響實驗數(shù)據(jù)的可靠性以及可重復(fù)性，這需要從來源、培養(yǎng)條件以及身份鑒定等多個維度進行嚴(yán)格把控。
腫瘤細(xì)胞株培養(yǎng)條件
不同種類的腫瘤細(xì)胞株，對于培養(yǎng)基，血清濃度以及氣相環(huán)境，有著特定的要求。貼壁細(xì)胞跟懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)方式差別很顯著，比如說，有一些細(xì)胞株，需要添加非必需氨基酸，或者丙酮酸鈉。培養(yǎng)之前，一定要查閱原始文獻，或者細(xì)胞庫說明，以此來確認(rèn)最佳的培養(yǎng)參數(shù)，防止因為環(huán)境不合適，造成細(xì)胞狀態(tài)不正?；蛘弑硇桶l(fā)生漂移。
腫瘤細(xì)胞株鑒定方法
拿到了新的細(xì)胞株之后，首先要去進行形態(tài)學(xué)方面的觀察，以及生長曲線的測定，不過最為可靠的鑒定方式卻是短串聯(lián)重復(fù)序列也就是STR分析。定期地開展支原體檢測同樣是必要的環(huán)節(jié)，因為支原體一旦污染就會改變細(xì)胞代謝以及基因表達(dá)的特征。建議每隔2到3個月就重復(fù)進行一次鑒定，以此來確保在實驗過程當(dāng)中細(xì)胞的身份并沒有發(fā)生交叉污染。
腫瘤細(xì)胞株污染處理
一旦發(fā)覺真菌或者細(xì)菌污染，就應(yīng)當(dāng)馬上隔離并且廢棄遭受污染的細(xì)胞，要徹底消毒培養(yǎng)箱以及工作臺面。針對于支原體污染，能夠使用專用清除試劑進行處理，不過處理完畢之后需要重新檢測來確認(rèn)。在日常操作當(dāng)中要嚴(yán)格執(zhí)行無菌技術(shù)，不同細(xì)胞株要使用獨立的培養(yǎng)瓶以及移液管，以此來避免交叉污染的風(fēng)險。
腫瘤細(xì)胞株傳代技巧
細(xì)胞傳代之際，若消化時間延續(xù)過長，或者吹打力度過猛，均會致使細(xì)胞膜受體遭受損傷，進而對后續(xù)實驗產(chǎn)生影響。建議依據(jù)細(xì)胞密度來調(diào)整傳代比例，通常1:3至1:6是較為常用的。需記錄每一株細(xì)胞的代次，當(dāng)超過30代之后，應(yīng)當(dāng)復(fù)蘇早期凍存的批次，這是由于長期進行培養(yǎng)，有可能引發(fā)遺傳變異以及功能改變。
