常用于實驗室對蛋白質(zhì)、激素等生物分子進行定量檢測的科研ELISA試劑盒,其檢測所得結(jié)果的準確性以及重復性,會直接對研究結(jié)論的可信度產(chǎn)生影響。在面對市場里眾多品牌以及規(guī)格的情況下,要選出契合自身實驗需求的試劑盒,得從幾個核心指標著手。
如何判斷試劑盒特異性
試劑盒具備的那種能識別目標分子,且不會跟其它類似物出現(xiàn)交叉反應的能力,就是特異性。去查看產(chǎn)品說明書里的交叉反應率數(shù)據(jù),一般情況下規(guī)定是要低于1%的。對于血清或者細胞裂解液一類的復雜樣本而言,高特異性顯得特別重要,要不然的話就有可能產(chǎn)生假陽性信號,進而消耗后續(xù)驗證時間。
靈敏度夠不夠用
試劑盒能檢測到的最低目標分子濃度由靈敏度決定,其單位通常是pg/mL或者ng/mL。選取匹配的靈敏度范圍時,你得依據(jù)樣本中待測物的預估含量來定,像低豐度因子就需要亞皮克級別的靈敏度。并且要留意動態(tài)檢測范圍,如果沒確保標準曲線的線性區(qū)間覆蓋你的樣本值可不行。
批間差怎么控制
批間差體現(xiàn)出不同批次試劑盒相互間的穩(wěn)定性,它是長期實驗具備可重復性的關(guān)鍵所在。優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品的批間變異系數(shù)也就是CV值,通常是低于10%的。采購期間能夠要求供應商給出批次質(zhì)檢報告,并且盡量一次性買夠同一批次的用量,以此減少批間差異針對數(shù)據(jù)疊加分析所產(chǎn)生的影響。
樣本類型需要匹配嗎
樣本前處理方式,不同試劑盒有著不一樣的要求,像血清樣本所需的稀釋倍數(shù),細胞上清是否要進行濃縮等情況。試劑盒說明書里驗證樣本類型,務必要確認和你手頭的保持一致,不然的話,就得自行開展加標回收實驗,以此來驗證適用性,防止因基質(zhì)效應而致使檢測出現(xiàn)偏差。






