生化檢測試劑盒于實驗室研究里起著基礎且關鍵的作用，不管是酶活性測定，抑或是代謝物分析，試劑盒的穩(wěn)定性徑直決定著最終數(shù)據(jù)的可信度，面對市場上品類繁雜眾多的產(chǎn)品，怎樣快速篩選出契合自身實驗體系的型號，是諸多科研人員日常遭遇的現(xiàn)實問題。
檢測原理是什么
進行定量分析的大多數(shù)生化檢測試劑盒，是基于顯色反應或者熒光信號的，其核心原理是，利用具有特異性的酶去催化底物，進而產(chǎn)生能夠被測量的光學變化。比如說，常用的葡萄糖氧化酶法，是通過生成過氧化氫，再與顯色劑發(fā)生反應的，其吸光度與目標物濃度是呈正比的。理解這些原理，對于判斷試劑盒是不是匹配樣本類型以及預期檢測范圍，是有幫助的。
試劑盒怎么保存
各異的組分，其保存條件存在較大差異，一般而言，酶以及標準品需要在零下二十攝氏度進行冷凍，然而緩沖液和顯色劑能夠在二至八攝氏度予以冷藏，反復進行凍融，會顯著致使酶活性降低，建議在首次解凍之后，按照單次使用量進行分裝，部分試劑盒的底物對光線敏感，需要使用鋁箔加以包裹來避開光線，收到產(chǎn)品以后，應當立刻核對說明書所標注的儲存要求，防止因存放不合適而造成批次之間數(shù)據(jù)出現(xiàn)波動。
如何避免假陽性
在樣本里存在的像血紅蛋白這般的內(nèi)源性干擾物，或者脂質(zhì)，又或者抗氧化劑，也許會引發(fā)非特異性顯色情況。有人提議，于檢測之前開展樣本稀釋操作，或者運用配套的樣本預處理管。加樣的順序以及孵育的時間，同樣需要嚴格依照規(guī)程執(zhí)行，要是混勻的程度不充分，就會致使局部底物過量。每一批次的實驗，都應當設置空白對照以及已知濃度的質(zhì)控品，以此能夠及時辨別出異常信號。
重復性驗證方法
選取同一樣本的低濃度、中濃度、高濃度，在同一塊板內(nèi)重復檢測三次，計算變異系數(shù)，再在不同天重復此操作，評估批間差異，通常試劑盒性能穩(wěn)定表明CV值低于10%，記錄每次檢測時的環(huán)境溫度、移液器校準日期以及操作人員，這些因素會對精密度產(chǎn)生直接影響，定期參加實驗室間的比對活動是更為客觀的驗證手段。
