上周和老同學(xué)李明打電話,他跟我倒了一肚子苦水。
原本呢,他于去年進(jìn)行了工作變動(dòng),前往城東某處的一家從事生物科技領(lǐng)域業(yè)務(wù)的公司,承擔(dān)并負(fù)責(zé)和免疫檢測方面有關(guān)的研發(fā)性質(zhì)的工作。
原本以為會(huì)是專業(yè)對口,進(jìn)而駕輕就熟,然而沒想到入職半年多之后,卻接連在同一個(gè)地方摔了跟頭。
他身處的那個(gè)部門,最近開啟一項(xiàng)需要頻繁借助 ELISA 試劑盒去對樣本開展定量分析的細(xì)胞因子檢測項(xiàng)目。
和我念叨的李明表示,這東西瞅著步驟挺簡易,也就是進(jìn)行加樣操作,然后從事孵育行為,接著開展洗板舉動(dòng),再后實(shí)施顯色動(dòng)作,隨后進(jìn)行終止流程,最后開展讀數(shù)工作。
但真做起來,數(shù)據(jù)總是忽高忽低,重復(fù)性差得離譜。
存在一批樣本,他在前后的過程當(dāng)中重復(fù)進(jìn)行了三次操作,然而結(jié)果卻是一次比一次更低,并且標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)從來都未曾達(dá)到過0.99。
主管找他談了好幾次話,話里話外都是對他實(shí)驗(yàn)操作能力的質(zhì)疑。
在那段特定的時(shí)間里,李明所承受的壓力極大。晚上九點(diǎn)過后好久,他依舊身處實(shí)驗(yàn)室之中,反復(fù)思索究竟是哪一個(gè)地方出現(xiàn)了差錯(cuò)。
他曾嘗試更換不同批次的試劑,他也檢查過酶標(biāo)儀的光路,他甚至還懷疑過自己移液的手感。
一直到今年三月剛開始的時(shí)候,他前往參與了一場處在行業(yè)范圍之內(nèi)的技術(shù)方面的交流會(huì)議,這之后才最終尋覓到問題最關(guān)鍵的那個(gè)點(diǎn)所在之處。
那里舉行了一場會(huì)議,在會(huì)上,存在這么一位資深工程師,這位工程師從事免疫檢測工作已經(jīng)有十多年的時(shí)間了,他特意去分享了一門課程,這門課程是關(guān)于ELISA實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性方面的。
李明聽完那番話語之后,瞬間恍然大悟,原來呀,他自己一直以來竟然都是憑借肉眼去判斷,洗板到底干不干凈。
每一回進(jìn)行洗板操作,皆是憑借著感覺去甩干,偶爾在拍打板子之際,用力過度,板子的孔底部直接就出現(xiàn)了劃痕。
在課上,工程師著重強(qiáng)調(diào),洗板這個(gè)環(huán)節(jié),看似不顯眼,然而卻是ELISA試劑盒使用期間,最為關(guān)鍵的變數(shù)根源。
如果殘留的液體沒有被拍干凈,那么會(huì)致使后續(xù)加入的試劑被稀釋,進(jìn)而造成信號值整體處于偏低的狀態(tài)。
要是用力去拍打板子,或者使得板孔長時(shí)間處于干燥環(huán)境里,那么就會(huì)致使包被在板底的抗體變得失活。
李明回想起來講,他在那段日子里所做的實(shí)驗(yàn),有著這樣的情況,大多數(shù)的數(shù)據(jù)呈現(xiàn)出,先是前半部分的板子性能良好,而后半部分的板子性能欠佳。
原因很簡單,洗板的時(shí)候從第一列開始,到最后一列結(jié)束。
第一列洗完馬上就加抗體,而最后一列可能已經(jīng)多晾了一兩分鐘。
就是這一兩分鐘的干燥時(shí)間,讓板底的抗體活性大打折扣。
之后回去,該說李明依據(jù)那位工程師 taught 的方法,重新設(shè)計(jì)了自己的操作流程。
每一塊96孔板,其中間只有60個(gè)孔會(huì)被用于特定操作,那邊緣的孔全部都要添加緩沖液,以此作為一種保護(hù)措施。
在進(jìn)行洗板操作時(shí),要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)匕芽孛看谓莸臅r(shí)間,使其保持一致,運(yùn)用多通道移液器,進(jìn)而保證加樣間隔不會(huì)超出30秒。
他特意去買了一個(gè)計(jì)時(shí)器,將每個(gè)孵育步驟開始的時(shí)間記錄在實(shí)驗(yàn)本上,又把每個(gè)孵育步驟結(jié)束的時(shí)間也記錄在實(shí)驗(yàn)本上。
這般進(jìn)行了兩周的調(diào)整,直至三月中旬以及下旬的時(shí)候,他再度對先前的那一批樣本展開了檢測。
第一次,標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值達(dá)成了0.994,三個(gè)重復(fù)孔的變異系數(shù)都在百分之八及其之下。
主管看了數(shù)據(jù)之后,破天荒地夸了他一句“這次做得不錯(cuò)”。
李明跟我說,那一刻他差點(diǎn)沒繃住,感覺這半年的憋屈一掃而空。
之前他講,自己一直覺得ELISA試劑盒操作是簡單的,完全沒必要耗費(fèi)過多心思去鉆研細(xì)節(jié)。
經(jīng)由這一回的教訓(xùn),他方才得以明白,越是那種看上去顯得簡單的實(shí)驗(yàn),往往是處處暗藏隱患的。
現(xiàn)在,他已然養(yǎng)成了一種習(xí)慣,每當(dāng)開啟一盒全新的ELISA試劑盒之時(shí),其都會(huì)率先將說明書自始至終地閱讀一番。
不是以往那種像騎馬快速看花式的看法,而是依照著說明書里所呈現(xiàn)的圖示,于腦海之中、把每一個(gè)步驟、逐一過一遍。
他總結(jié)了一份內(nèi)容,是他自己曾經(jīng)踩過的坑以及與之對應(yīng)的解決方法,之后把這份內(nèi)容打印出來,然后貼在了實(shí)驗(yàn)室的冰箱門上。
要是有加樣這一行為,特別是在加樣之時(shí),槍頭絕對是不可以碰及板孔底部的,不然的話,就會(huì)致使包被層出現(xiàn)刮傷的狀況。
像顯色劑而言,它是必須要進(jìn)行避光保存的,并且在使用之前,得提前從冰箱當(dāng)中拿出來,使其恢復(fù)到室溫狀態(tài)。
又比如說,終止液加入的順序,一定得是,加完一列之后,就進(jìn)行混勻操作那一列,而絕不是,把所有的都加完了,才一起混合。
這些細(xì)節(jié)說明書上其實(shí)都寫了,只是以前的他根本沒有當(dāng)回事。
今年四月的最后一個(gè)時(shí)刻,公司承接了一項(xiàng)全新的檢測項(xiàng)目,樣本數(shù)目甚多,分配的用時(shí)極為緊迫,要承擔(dān)執(zhí)行的作業(yè)量壓力頗大。
領(lǐng)導(dǎo)點(diǎn)了李明的名,讓他負(fù)責(zé)這個(gè)項(xiàng)目里的ELISA檢測部分,還表示他目前的操作狀是最穩(wěn)定的。
李明獨(dú)自一個(gè)人,耗費(fèi)了三天的時(shí)間,達(dá)成了整整十二塊板子的檢測工作,并且所有的數(shù)據(jù)一次性就通過了復(fù)核。
他在那天的時(shí)候,給我發(fā)送了消息,聲稱終于領(lǐng)會(huì)到了“把一件事做到極致”究竟是什么樣的感覺。
主管之前找其談話,到現(xiàn)在給他委以重任,中間時(shí)間間隔僅兩個(gè)月。
所以,要是你也在實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中,因ELISA試劑盒的數(shù)據(jù)而深陷折磨,以至于頭疼不已,那么不妨?xí)呵彝O?,認(rèn)認(rèn)真真地仔細(xì)思索一番。
是否就是那樣一種操作細(xì)節(jié),它是你向來從未曾放在心上留意過的,此刻正靜悄悄地致使你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果遭到破壞呢。
正如李明所講的那樣,實(shí)驗(yàn)要是做不好,這并非是可怕的事情,然而,可怕之處在于,每一回都運(yùn)用相同的錯(cuò)誤方式來重復(fù)自身。
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