上個月,老張身處實驗室,對著顯微鏡持續(xù)看,看了足足三個小時,最終才長舒一口氣。他是我知曉十年的老朋友,于一家生物技術公司司職細胞培養(yǎng),已然干了將近八年,按常理講早就該得心應手了。然而去年那場“細胞株事故”,差點致使他丟失掉整個實驗批次的進度。
老張所主要負責的,乃是腫瘤藥物篩選工作處于前期階段的事務,簡單來講,便是要將細胞株培育好,確保每一批次細胞具備穩(wěn)定性以及一致性,然后才能夠使得后續(xù)的測試數據擁有說服力。以往呢,他所使用的皆是公司祖?zhèn)飨聛淼哪菐字昙毎辏趥鞔鷰资沃?,結果變得愈發(fā)不穩(wěn)定起來。去年六月,他于一次關鍵的藥效測試當中發(fā)現,半數抑制濃度竟然比之前差了差不多一個數量級。
那時老張覺得是操作方面出現了狀況,重新配制了培養(yǎng)基,更換了一批血清,就連培養(yǎng)箱的溫度探頭都進行了一遍校準,如此折騰了足足兩周時間,然而結果卻依舊是原來那般模樣。他心里明白,問題是出在細胞株自身這個點上,也就是傳代的次數太多了,致使部分細胞已發(fā)生了基因漂變。
他嘗試著于網絡之上搜尋“細胞株代次對實驗結果的影響”,瞅見好多同行也碰到相似情形。有人給出縮短使用周期的提議,有人舉薦重新從原代庫復蘇,另外有人提及了運用經過嚴格質控的標準化細胞株資源。老張一番查詢才發(fā)覺,原來在國內已然存在幾家機構在進行細胞株的保藏以及供應,像中科院細胞庫這般,并且還有一些第三方檢測平臺能夠提供細胞株的STR鑒定服務。
去年九月,老張狠下心,經由正規(guī)途徑引進了一株全新的細胞株,與此同時,他給自家的舊細胞株做了STR鑒定。結果顯現后,連他自己都猛地一驚,舊細胞株的基因圖譜跟標準庫里的參考圖譜于三個位點存有差異。這表明,過去半年里他的所有實驗數據,皆是基于一個有偏差的模型而得出的。
“后來,老張跟我喝酒時感慨,假設,早半年做這個鑒定,能省下多少時間以及經費?!彼氵^一筆賬,重新訂購細胞株加上鑒定的費用,大概不到五千塊,然而,因為數據不靠譜致使重復實驗、延期交付、甚至被客戶質疑,前前后后損失了十幾萬。
老張在換了新細胞株后,嚴格依照一種標準化的流程來操作,這個流程是每十代就要去做一次STR鑒定,還要定期對支原體污染情況進行檢查,并且要保證凍存液的配比以及復蘇步驟都和規(guī)范相契合。今年三月的時候,他參與的那個從事藥物篩選的項目順利完成結題,客戶對于其中數據的重復性表現出了極為滿意的態(tài)度。
就現在而言,老張逢人便講一物,那便是細胞株,此等事物,乍一看似乎簡單,然而實際上卻是整個實驗鏈條當中,最容易被人所忽視的如同“暗礁”般的存在。他歸納了幾條經驗:其一,切莫迷信所謂“祖?zhèn)骷毎?,因為哪怕是再穩(wěn)定的細胞株,同樣存在漂變的風險;其二,當引進新的細胞株之時,務必要去做STR鑒定,切不可貪圖省事;其三,要構建起嚴格的傳代檔案,用以記錄每一回復蘇以及傳代的日期、代次、操作人。
僅僅就在前些日子,他給我發(fā)送了消息,告知公司已然將他所負責擬定的這套流程,推廣至整個實驗室范圍之內,新入職的員工所經歷的培訓的第一堂課,講授的內容便是“細胞株管理規(guī)范”。此外, 他還以一種開玩笑的方式表示,伴隨這一轉變發(fā)生,自己從原本被稱呼為“養(yǎng)細胞的老張”,轉變成為了如今被叫做“訓細胞的老張”。
要是你同樣正為細胞株的挑選以及管理而犯愁,那么為何不不妨首先試著從開展一次STR鑒定著手呢。好多問題,當把它們查明白弄清楚 afterward反而就變得簡單起來了。






