開頭：這篇文章能幫你省下至少一半的試劑和時(shí)間
假如你于基層實(shí)驗(yàn)室開展工作，每日直面數(shù)量繁多的生化樣本，然而僅有一臺(tái)半自動(dòng)生化分析儀，你必定領(lǐng)略過那種時(shí)間緊迫、樣本眾多、忙得手忙腳亂的感受。我正是從那個(gè)階段歷經(jīng)過來的。今日，我打算借助我一位朋友老張的真切經(jīng)歷，談?wù)撘幌挛宸ㄉ瘷z測(cè)此項(xiàng)技術(shù)，以及它怎樣改變了他的工作步調(diào)。
老張的困境：樣本堆成山，機(jī)器卻跟不上
那是在2019年，一場(chǎng)檢驗(yàn)技術(shù)交流會(huì)上，我認(rèn)識(shí)了老張，他在北方某地的縣級(jí)疾控中心實(shí)驗(yàn)室工作了八年，那個(gè)實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)縣區(qū)內(nèi)的慢病篩查以及傳染病監(jiān)測(cè)，每年春秋兩季會(huì)開展集中體檢，每天的樣本量能超過四五百份。
其設(shè)備又在哪呢？有著一臺(tái)歷經(jīng)六年之久的半自動(dòng)生化分析儀，一次至多能運(yùn)行十幾個(gè)樣本，每次更換試劑時(shí)必須手動(dòng)清洗比色杯。老張與我講，在那段期間他每日加班直至晚上九點(diǎn)，手洗凈到脫皮的程度了。
2022年4這個(gè)月份，他們接到了轄區(qū)所布置的“三高”篩查任務(wù)，需要在一個(gè)月的時(shí)間之內(nèi)完成三千份血樣的血糖檢測(cè)，以及血脂四項(xiàng)檢測(cè)。老張進(jìn)行了一番計(jì)算，按照當(dāng)時(shí)的速度，再加上日常門診樣本，根本就無法完成。
第一次嘗試：他開始尋找替代方案
在壓力籠罩之下，老張著手開始在各處進(jìn)行打聽，他先是在網(wǎng)絡(luò)上搜索“生化檢測(cè)快速方法”，然而呈現(xiàn)出來的卻是一堆全自動(dòng)流水線的廣告，這些廣告價(jià)格動(dòng)不動(dòng)就是幾十萬，他直接將其劃走了，他接著又去搜索“半自動(dòng)分析儀提速技巧”，所找到的帖子要不然就是說“多加人手”，要不然就是說“換機(jī)器”，可是卻沒有一條是能夠?qū)嶋H施行的。
5月中旬出現(xiàn)了轉(zhuǎn)折點(diǎn)，他偶然在行業(yè)論壇上看到一個(gè)帖子，這個(gè)帖子談?wù)摰氖恰拔宸ㄔ诨鶎訉?shí)驗(yàn)室的應(yīng)用”，發(fā)帖人是一位來自南方鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院的同行，這位同行表示他運(yùn)用96孔微板配合酶標(biāo)儀來做生化檢測(cè)，效率提高到了原來的三倍。
當(dāng)時(shí)，老張的第一反應(yīng)是，“這靠譜不？”畢竟，在他的認(rèn)知所處里頭，進(jìn)行生化檢測(cè)這一行為，那可是必須得用到專用的生化分析儀的，而且他認(rèn)為比色杯得是石英材質(zhì)的那種，波長(zhǎng)還得精確到納米級(jí)別的程度才行。對(duì)于微板法，在他的看法觀點(diǎn)當(dāng)中，那是搞免疫檢測(cè)范疇的，它又怎么能夠用來做生化檢測(cè)？
深入調(diào)研：微板法生化檢測(cè)到底行不行
那個(gè)老張，并未盲目地去跟風(fēng)，他耗費(fèi)了兩天的時(shí)間，將那個(gè)帖子下方的兩百多條回復(fù)全部仔仔細(xì)細(xì)地看完了 ，他察覺到，好多人都在針對(duì)微板法生化檢測(cè)的可行性展開討論 ，分歧顯得特別大。
那些持支持態(tài)度的人講，只需選恰當(dāng)?shù)脑噭┖?，采用合格的微板，將酶?biāo)儀的波長(zhǎng)校對(duì)精準(zhǔn)，其結(jié)果與生化分析儀不存在明顯的差異。而那些持反對(duì)態(tài)度的人著重指出，微板法所具有的線性范圍狹窄，重復(fù)性欠佳，極易受到孔間差的干擾。
老張拿定主意要自己動(dòng)手去嘗試一番，為此他主動(dòng)聯(lián)系了帖子的創(chuàng)作者，也就是那位姓劉的科長(zhǎng)，這位劉科長(zhǎng)為人特別爽快，不僅將所使用的試劑廠商告知給他，還把微板的型號(hào)，甚至酶標(biāo)儀的參數(shù)都一一告訴了老張，不僅如此，劉科長(zhǎng)還專門發(fā)過來一份由他自己撰寫的《微板法生化檢測(cè)操作SOP》，這份文檔里面詳細(xì)地寫明了每一步操作所需要注意的事項(xiàng)。
實(shí)踐出真知：第一步就碰了釘子
2022年6月剛開始的時(shí)候，老張依照劉科長(zhǎng)所制定的方案，購(gòu)買了三盒屬于進(jìn)口品牌的血糖檢測(cè)試劑，又采購(gòu)了一箱具備高透光特性的96孔板，并且還借用了同在一個(gè)縣的中醫(yī)院檢驗(yàn)科閑置著的一臺(tái)酶標(biāo)儀。
首度進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，他挑選了二十份已知濃度的血清樣本。此后將這些樣本分別運(yùn)用半自動(dòng)生化分析儀以及微板法來實(shí)施葡萄糖檢測(cè)。當(dāng)結(jié)果呈現(xiàn)出來后，他愣住了：微板法所測(cè)的OD值普遍處于偏低狀態(tài)。并且經(jīng)計(jì)算得出的濃度相較于生化分析儀而言低了10%到15%。
當(dāng)時(shí)，老張即刻垂頭喪氣，意識(shí)此路行不通。他致電劉科長(zhǎng)。對(duì)方提出這幾個(gè)關(guān)鍵問題：微板有無預(yù)先清洗？加樣之后靜默的時(shí)長(zhǎng)久暫是否充足？波長(zhǎng)選定的數(shù)值是500納米抑或505納米？
老張逐一進(jìn)行對(duì)照，發(fā)覺問題出在了微板預(yù)處理方面，他所購(gòu)買的是未包被的普通微板，直接拿去使用，那孔底存在靜電情況，致使液滴分布不均衡，再加上他所使用的試劑反應(yīng)終點(diǎn)法需要505nm波長(zhǎng)，他卻默認(rèn)設(shè)置成了500nm。
重新調(diào)整：微板法生化檢測(cè)的關(guān)鍵參數(shù)
有著老張這個(gè)人，他把微板使用超純水預(yù)先清洗了兩遍，之后又使用無塵布將其擦干，在加樣完成之后放在溫度為37℃的孵育箱里使其靜靜放置10分鐘，接著才開始進(jìn)行讀數(shù)。并且波長(zhǎng)也被改成了505nm。隨后又重新進(jìn)行了一遍操作，最終結(jié)果和生化分析儀的對(duì)標(biāo)率達(dá)到了97%以上。
這一步前行顯得磕磕絆絆，然而老張內(nèi)心卻踏實(shí)了下來，他于在2022年6月15日的實(shí)驗(yàn)記錄本之上寫下：“微板法進(jìn)行生化檢測(cè)是可行的，不過細(xì)節(jié)乃是決定成敗的關(guān)鍵所在。微板的預(yù)處理、加樣的手法、波長(zhǎng)的校準(zhǔn)、反應(yīng)的時(shí)間，這四個(gè)要素之中缺少任何一個(gè)都是不行的?！?。
正式上線：用微板法搞定三千份篩查任務(wù)
因有了首次成功的經(jīng)驗(yàn)，老張著手制定批量檢測(cè)方案，他將微板依96孔進(jìn)行設(shè)計(jì)，每板涵蓋2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，2個(gè)空白孔，2個(gè)質(zhì)控孔，剩余90孔用于樣本，每板一次能夠檢測(cè)90份樣本，相較于半自動(dòng)分析儀一次檢測(cè)12份提高了7倍有余。
2022年6月20日，他跟一名同事已然正式著手開展工作之事。兩人有著分工安排：老張承擔(dān)加樣以及上機(jī)操作，同事負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)記錄還有試劑準(zhǔn)備工作。他們施行“流水線式”操作模式：一邊進(jìn)行加樣任務(wù)，與此同時(shí)一邊開展跑板工作，并且一邊處理上一板所涉及的數(shù)據(jù)。
第一天結(jié)束時(shí)，他們做完了四板總計(jì)360份樣本的血糖測(cè)驗(yàn)，再算上以前借助生化分析儀做完的日常樣本，當(dāng)日總的完成數(shù)量快要達(dá)到500份。老張講，這是他工作八年當(dāng)中，頭一回在下午五點(diǎn)前頭下班。
細(xì)節(jié)優(yōu)化：微板法生化檢測(cè)的坑和填坑方法
老張?jiān)谶B續(xù)操作一周后，總結(jié)出了幾個(gè)在實(shí)踐中必須注意的點(diǎn)。
加樣的順序得是固定不變的，他是按照從左邊向著右邊、從上面朝著下面這樣的方向來加樣的，目的在于防止出現(xiàn)漏加或者重復(fù)加樣的情況，第二呢，每一塊板都得帶上標(biāo)準(zhǔn)品以及質(zhì)控品，這是絕對(duì)不能省去的，曾經(jīng)有一回他們?yōu)榱粟s產(chǎn)量，接連跑了兩塊板都沒有帶上質(zhì)控品，結(jié)果到了第三板的時(shí)候數(shù)據(jù)出現(xiàn)了異常，不得已返工了兩塊板，反倒白白浪費(fèi)了時(shí)間，第三，微板讀完數(shù)之后就得馬上導(dǎo)出數(shù)據(jù)，以此來避免因?yàn)槊笜?biāo)儀死機(jī)而致使數(shù)據(jù)丟失，第四，所有的微板都一定得使用同一個(gè)批次的，不同批次的微板其透光率存在著差異，這是會(huì)對(duì)結(jié)果的一致性造成影響的。
截至7月15日之時(shí)，三千份用于篩查的樣本均已全部完成，在相關(guān)數(shù)據(jù)匯總并上報(bào)之后呢，上級(jí)進(jìn)行審核且一次性通過了。老張于總結(jié)報(bào)告里如此寫道：“微板法生化檢測(cè)于基層實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中具備高度的可操作性以及經(jīng)濟(jì)性，其關(guān)鍵之處在于規(guī)范操作流程?！薄?/p>
推廣經(jīng)驗(yàn)：微板法生化檢測(cè)成了科室的常規(guī)方法
自打篩查任務(wù)落幕之后，老張將微板法生化檢測(cè)寫進(jìn)了科室的SOP里頭，使其成為半自動(dòng)生化分析儀的補(bǔ)充辦法。當(dāng)碰到大批量樣本之際，優(yōu)先運(yùn)用微板法；而常規(guī)少量樣本就采用分析儀。從2023年一直到如今，他們實(shí)驗(yàn)室每年憑借微板法完成的生化檢測(cè)數(shù)量超過一萬份，試劑成本降低了大概40%，人力成本節(jié)省了一半。
就在最近一回進(jìn)行通電話期間，老張跟我講，他們?cè)诮衲晷沦?gòu)置了一臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，然而微板法卻依舊還在被使用著。這是由于存在一些特殊的項(xiàng)目，像總蛋白、白蛋白這種其線性范圍較為寬泛的檢測(cè)項(xiàng)目，運(yùn)用微板法再加上酶標(biāo)儀，所得到的結(jié)果既快速又良好，而全自動(dòng)的方式反倒需要排隊(duì)等候樣本。
結(jié)尾：把方法分享給更多基層同行
在老張的故事并非個(gè)例的情況下，于我所接觸的基層實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中，越來越多的人正嘗試微板法生化檢測(cè)了。對(duì)此方法而言，不需要投入昂貴的設(shè)備，僅僅只需要一臺(tái)酶標(biāo)儀，一批合格的微板以及配套的試劑，便能夠?qū)⑿侍嵘先チ恕?/p>
若是你同樣正為樣本數(shù)量眾多、設(shè)備存在局限而感到苦惱時(shí)，不妨去了解一下微板法生化檢測(cè)這一情況。從老張所擁有的實(shí)際操作經(jīng)歷方面分析可得，只要將其中的細(xì)節(jié)處理安排妥當(dāng)，它亦將會(huì)是一種值得長(zhǎng)久一直去運(yùn)用的方法。期望這一篇文章能夠?qū)δ惝a(chǎn)生助益作用，并且也熱忱歡迎伱去進(jìn)行收藏或者轉(zhuǎn)而發(fā)送給有需要的同行人員。
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