之前有一陣兒，老張組織了飯局，大家吃飯時(shí)，酒喝了幾輪后，老張開始傾訴苦衷。老張是我們這個圈子里被大家一致認(rèn)可的技術(shù)能力很強(qiáng)的人，他在中科院的某個研究所工作了八年，去年，他換到了一家剛開始創(chuàng)業(yè)的生物公司擔(dān)任研發(fā)總監(jiān)。
本以為憑借他的資歷，去到那里能夠大展拳腳，然而結(jié)果卻是第一個項(xiàng)目就遭遇了被卡住脖子的狀況。他們的團(tuán)隊(duì)主要致力于一個腫瘤免疫方向的細(xì)胞治療課題，在前期的時(shí)候?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)都表現(xiàn)得頗為漂亮，只是恰恰在到了需要大量穩(wěn)定、可追溯的細(xì)胞株來做驗(yàn)證的這個時(shí)候，出現(xiàn)了問題。
你可曉得最為離譜的情形是啥嗎 ，老張猛地灌了一口啤酒 ，我們先前合作的某一個細(xì)胞庫 ，發(fā)過來的批次當(dāng)中離奇地混有支原體 ，造成整個課題組足足停擺了三個星期 ，好幾萬塊錢的試劑費(fèi)用如同打了水漂一般無可挽回 ，且三個博士的畢業(yè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)全部報(bào)廢了。
科研細(xì)胞庫這東西，到底值不值得花錢買？
那會兒老張才剛開始接手該項(xiàng)目，他的第一反應(yīng)便是“自己養(yǎng)”，畢竟他們那個實(shí)驗(yàn)室是具備全套培養(yǎng)設(shè)備的，平常也有對一些常用細(xì)胞系進(jìn)行傳代保存的操作，他認(rèn)為花錢從外面去購買細(xì)胞，完全就是在浪費(fèi)經(jīng)費(fèi)。
在第二周的時(shí)候，他們所使用的 Hela 細(xì)胞呈現(xiàn)出了形態(tài)方面的異常情況，核周位置出現(xiàn)了空泡現(xiàn)象，并且貼壁率顯著下降，老張趕忙進(jìn)行緊急排查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)原來是實(shí)驗(yàn)室中長期用來培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)箱 CO? 濃度校準(zhǔn)出現(xiàn)了差錯，導(dǎo)致整批細(xì)胞都遭受了污染。
他進(jìn)行了一番算賬，自己去開展建庫、傳代以及質(zhì)控工作，采用一臺培養(yǎng)箱，配備一名專職技術(shù)員，加上每月的耗材以及檢測所需費(fèi)用，將這些費(fèi)用平攤下來，每一株細(xì)胞所產(chǎn)生的隱形成本居然超過了三千元。然而要是從正規(guī)的科研細(xì)胞庫去進(jìn)行購買，一株經(jīng)過STR鑒定且不存在支原體污染的細(xì)胞，其價(jià)格處于八百到一千五這個區(qū)間之內(nèi)。
重點(diǎn)在于，人家所出具的那份報(bào)告之中，細(xì)胞的來源、代次以及鑒定數(shù)據(jù)皆是清清楚楚明明白白的。在進(jìn)行投稿之際，審稿人要求你去提供細(xì)胞溯源證明，你能夠把它拿出來嗎？
科研細(xì)胞庫的細(xì)胞，和實(shí)驗(yàn)室自養(yǎng)的到底差在哪？
后續(xù)老張聽取了一位身為同行領(lǐng)域佼佼者并且資歷深厚堪稱前輩之人給出的建議，去到實(shí)地對三家處于國內(nèi)范疇之內(nèi)的科研細(xì)胞儲存提供者展開全面考察。直至這時(shí)他方才真正明確，原本自己針對“購置細(xì)胞”這一事件所形成的領(lǐng)悟?qū)嵲谑翘^淺薄單一了。
排在首位的是“身份證”方面的問題，實(shí)驗(yàn)室自行傳代的細(xì)胞，在不少情形下，僅僅曉得“這是某某實(shí)驗(yàn)室于幾年之前從ATCC購置而來，后續(xù)便一直持續(xù)培養(yǎng)”，至于其間到底傳代了多少回，有沒有出現(xiàn)過污染狀況，又有沒有與其他細(xì)胞系相互混淆過，全然依賴技術(shù)員的口頭告知。
有著完整 STR 圖譜的正規(guī)科研細(xì)胞庫中的每一株細(xì)胞，老張看到了一份報(bào)告，這份報(bào)告里除了有物種鑒定還有細(xì)胞株特異性位點(diǎn)分析，并且還標(biāo)注了該細(xì)胞在 PubMed 上被引用的文獻(xiàn)列表，這意味著什么呢？意味著你所使用的細(xì)胞跟全球同行做實(shí)驗(yàn)之時(shí)所使用的細(xì)胞是同一個遺傳背景，實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性就是這樣的底層保障。
接著是污染方面的把控，實(shí)驗(yàn)室較常出現(xiàn)的狀況是，“養(yǎng)著養(yǎng)著就出現(xiàn)交叉污染的情況了”，比如說，你同時(shí)對293T以及HepG2進(jìn)行培養(yǎng)，稍有不慎吸頭碰到培養(yǎng)容器的瓶口，兩種細(xì)胞就會相互混淆了。
據(jù)老張談?wù)摚鶇⒂^的那處科研細(xì)胞庫，其整個操作區(qū)域是依據(jù)GMP標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行分區(qū)的。該庫內(nèi)，陽性細(xì)胞是在獨(dú)立生物安全柜里操作的，陰性細(xì)胞也是在獨(dú)立生物安全柜里操作的，不同物種的細(xì)胞同樣是在獨(dú)立生物安全柜里操作的。并且，每一批次細(xì)胞在出庫之前，必定要經(jīng)過三重檢測，這三重檢測分別是支原體PCR檢測，細(xì)菌真菌培養(yǎng)檢測，STR鑒定檢測。只要其中有一項(xiàng)檢測不通過，那么整批細(xì)胞就要被報(bào)廢處理。
科研細(xì)胞庫的售后，才是最容易被忽視的坑
有的一個人是老張，他曾經(jīng)跟一個規(guī)模較小的供應(yīng)商有過合作，這個供應(yīng)商所提供的產(chǎn)品價(jià)格著實(shí)低廉，僅僅每一株就要八百塊錢，老張踩過這個坑，后來等到細(xì)胞送達(dá)之后呢，開展了兩天的培養(yǎng)工作，然而細(xì)胞呈現(xiàn)出來的狀態(tài)相當(dāng)糟糕，細(xì)胞貼壁顯得十分松散，而且其增殖速度極為緩慢。
他與售后取得聯(lián)系，售后吩咐說“把照片拍攝好了發(fā)送過來以供查看”。老張依照要求發(fā)送了照片，售后接著又要求進(jìn)行臺盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)操作。如此這般折騰了整整兩天時(shí)間，最終得出的結(jié)論為“在運(yùn)輸?shù)倪M(jìn)程當(dāng)中溫度形成波動，這種波動極有可能對細(xì)胞的活力產(chǎn)生了影響”。而后便沒有后續(xù)的行為了——既不會補(bǔ)發(fā)，也不會退款，給出的理由是“冷鏈運(yùn)輸所存在的不可控因素實(shí)在是太多了”。
“那時(shí)候我真是氣得肝疼?！崩蠌堈f。
之后呢，他轉(zhuǎn)而進(jìn)入的此家展開科研相關(guān)事宜的細(xì)胞庫，在簽訂合約之際清晰寫明了：當(dāng)細(xì)胞貨物抵達(dá)之后的48小時(shí)范圍以內(nèi)，只要是依據(jù)操作闡明來實(shí)施培養(yǎng)操作時(shí)，一旦出現(xiàn)活力比90%要低的情形或者是能夠憑借肉眼觀察到的污染狀況，便會干脆直接地豁免費(fèi)用為其再次補(bǔ)發(fā)一株，而且還要承擔(dān)運(yùn)輸所產(chǎn)生的費(fèi)用。
老張講，你可別小瞧了這般諾言。于往細(xì)胞運(yùn)輸之際，干冰遇熱蒸發(fā)、保溫箱出現(xiàn)損壞、快遞發(fā)生延遲狀況，如此意外誰都難以確保百分百不會出現(xiàn)。然而可靠的供應(yīng)商會將這類風(fēng)險(xiǎn)自己肩負(fù)著，并非推脫至客戶身上。
科研細(xì)胞庫的資質(zhì)，到底要看哪幾樣？
現(xiàn)今，老張已成為了近半之選庫專家，他歸納出了一套標(biāo)準(zhǔn)，每當(dāng)同行業(yè)之人交談之際，他都會予以分享。
查一查是否持有《實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證》，亦或是《實(shí)驗(yàn)動物使用許可證》。眾多細(xì)胞乃是從動物組織里進(jìn)行原代分離所得，若沒有此證，那你細(xì)胞的來源就不符合規(guī)定。一旦在投稿之際編輯較起真來，你連一丁點(diǎn)解釋的機(jī)會都不會擁有嘍。
看著ISO認(rèn)證，可不是一般的隨便一個ISO證書就能算數(shù)的，得看是不是由CNAS認(rèn)可的第三方頒布發(fā)放的才行。老張著重提到了ISO 20387這個標(biāo)準(zhǔn)，它是專門針對于生物樣本庫有著認(rèn)證有關(guān)的。擁有ISO 20387認(rèn)證的科研細(xì)胞庫，這表明它的樣本采集、處理、儲存、分發(fā)整個流程都在嚴(yán)格審計(jì)下通過了。
查看細(xì)胞代次的記錄，眾多實(shí)驗(yàn)室傾向選用傳代次數(shù)較少的細(xì)胞，認(rèn)為其“年輕”，然而實(shí)際上只要處于第5代至第20代這個范圍之內(nèi)，細(xì)胞特性都是穩(wěn)定的，關(guān)鍵之處在于科研細(xì)胞庫能否給出準(zhǔn)確的代次記錄，而非模棱兩可地表述為“大約傳了十幾代”。
要看看可不可以開具符合規(guī)定的發(fā)票，這話讓人聽著好似沒什么實(shí)質(zhì)意義的話，然而老張講他碰到過屬于個體戶性質(zhì)的供應(yīng)商，僅僅能夠開具收據(jù)，并且他們這個項(xiàng)目的經(jīng)費(fèi)源自國家自然科學(xué)基金，必定要實(shí)行公對公轉(zhuǎn)賬，要是沒有增值稅專用發(fā)票完全沒法進(jìn)行報(bào)銷。
科研細(xì)胞庫推薦，老張現(xiàn)在就用這家
談到這個地方，老張拿出手機(jī)，給我展示了一個訂單截圖，截圖上是上海的一家名為“賽庫生物”的科研細(xì)胞庫，他上個月才從那里訂購了一批人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，以及肺成纖維細(xì)胞。
張先生表示，他如今基本上就認(rèn)準(zhǔn)這一家了 ，緣由十分簡單，這家的細(xì)胞是現(xiàn)貨。好多庫存你得等著排期 ，動不動就要一兩周。那家?guī)炖锍Ｄ瓿掷m(xù)性地維系著三千株以上的庫存數(shù)量 ，今日下單明日就發(fā)貨。
他把那有著STR圖譜，支原體檢測呈陰性，細(xì)菌真菌檢測為陰性，細(xì)胞活力是92% ，傳代次數(shù)為P5的他們的質(zhì)檢報(bào)告單給我看了 ，每一項(xiàng)數(shù)據(jù)后面都存在著檢測員簽名以及日期。
要知道，最為關(guān)鍵的在于，他們家的技術(shù)客服是實(shí)實(shí)在在地懂行。老張講道，曾經(jīng)有一回，他所養(yǎng)的一株細(xì)胞狀態(tài)忽然間變差了，他懷疑是培養(yǎng)基出現(xiàn)了問題?？头]有讓他直接進(jìn)行換液操作，反而是建議他先去做一次細(xì)胞支原體快檢，果真查出了低度感染。要是在彼時(shí)不做這一舉措，盲目地去換培養(yǎng)基，只會致使污染擴(kuò)散開來。
當(dāng)下，老張只要見到人，就立馬推薦這家?guī)臁Ｋv，從事科研工作的人，其時(shí)間是最為珍貴值錢的，相較于在細(xì)胞源頭那里不斷反復(fù)地進(jìn)行試錯，倒不如直接一步到位去挑選一個靠譜的。
要是你同樣正為細(xì)胞來源而發(fā)愁，那不妨去參照老張的經(jīng)驗(yàn) ，科研這條道路，出現(xiàn)走彎路這樣的情況本并不可怕，然而可怕的是在同一個坑那里反復(fù)地 將腳崴傷 ，選對一個科研方面的細(xì)胞庫，能夠幫你節(jié)省下去最少半年用于試錯的時(shí)間。
