朋友的工作，與試劑盒的那些事
我存在一位名為老張的朋友，有著在蘇州一家從事植物提取物成分分析的生物科技公司擔(dān)任研發(fā)主管的工作經(jīng)歷，該公司每日都需處理數(shù)量眾多的樣品，老張步入此行業(yè)已接近十年時(shí)間，對(duì)于各類檢測(cè)方法均不感到陌生，然而在最近這半年期間，他向我傾訴頻次最高的事情，便是“比色法試劑盒”這一事項(xiàng)。
初時(shí)，我尚不明白他緣何這般糾結(jié)。畢竟于諸多實(shí)驗(yàn)室之中比色法試劑盒皆為標(biāo)配，其操作簡易，成本低廉，結(jié)果直觀，乃是諸多初篩以及快速檢測(cè)場(chǎng)景之首選。然而老張稱，事情并非如此簡單。
比色法試劑盒真的準(zhǔn)嗎？——一次方法的驗(yàn)證風(fēng)波
第一次用試劑盒，結(jié)果讓人慌
今年三月份的時(shí)候，老張接到了一個(gè)新項(xiàng)目，這個(gè)新項(xiàng)目要求在短時(shí)間之內(nèi)檢測(cè)一百多個(gè)樣品里的總黃酮含量，公司以前一直采用高效液相色譜法，然而由于樣品量實(shí)在太大，導(dǎo)致色譜儀的排期根本沒辦法跟緊需求，于是老張想到了比色法試劑盒，看中它速度快以及操作門檻低這兩點(diǎn)。
他徑直從采購部拿了一款于市面上擁有不錯(cuò)銷量的比色法試劑盒，次日便著手去試了。而后第一批數(shù)據(jù)出來，他愣住了。針對(duì)同一個(gè)樣品，他開展了三次平行操作，數(shù)據(jù)差異居然超過了百分之二十。而這在質(zhì)量控制范疇內(nèi)，屬于壓根不能使用的數(shù)據(jù)。
老張跟我講，他那時(shí)心里瞬間涼了一大截，心里尋思著是不是試劑盒自身原本壓根就不可靠。
排除干擾，找到問題癥結(jié)
他并未急忙去下結(jié)論，而是將問題予以拆分之后展開分析，他首先對(duì)樣品的前處理過程進(jìn)行了檢查，察覺到樣品自身的顏色相對(duì)較深，或許對(duì)吸光度造成了干擾，他接著查閱了試劑盒的說明書，其上的確提及了“樣品顏色對(duì)檢測(cè)結(jié)果存有影響”，然而卻并未給出具體的修正辦法。
老張?jiān)俣热シ喠巳舾善墨I(xiàn)，從中發(fā)覺比色法試劑盒于實(shí)際運(yùn)用里，樣品的基質(zhì)效應(yīng)這一因素、反應(yīng)時(shí)間這一要素、溫度波動(dòng)這一狀況，全會(huì)對(duì)最終數(shù)據(jù)造成影響。他嘗試著對(duì)反應(yīng)時(shí)間予以調(diào)整，將其從十五分鐘延長至二十五分鐘，并且還用空白對(duì)照對(duì)樣品自身的顏色背景做了校正。在開展第二次實(shí)驗(yàn)時(shí)，數(shù)據(jù)的一致性顯著好多了，誤差被控制在百分之五以內(nèi)。
他發(fā)出感慨聲稱，試劑盒自身不存在問題，是自己去把它考慮得太過簡單了，比色法試劑盒準(zhǔn)不準(zhǔn)確，關(guān)鍵性的要點(diǎn)在于你是否會(huì)去運(yùn)用它。
比色法試劑盒的優(yōu)劣勢(shì)，搞清楚才不踩坑
優(yōu)勢(shì)：快、省、門檻低
后來老張跟我講，比色法試劑盒最大的優(yōu)勢(shì)在于“快”，不需要繁雜儀器，一個(gè)分光光度計(jì)或者酶標(biāo)儀便可搞定，對(duì)于大批量樣品的初篩而言，效率超高，成本相較于液相色譜也低許多，一個(gè)試劑盒能測(cè)幾百個(gè)樣品，平攤下來每個(gè)樣品的成本僅有幾塊錢。
此外，操作的門檻著實(shí)是低的。技術(shù)員僅需會(huì)進(jìn)行加樣，會(huì)實(shí)施孵育，會(huì)開展讀值，基本上上手便能夠做。針對(duì)于小型實(shí)驗(yàn)室或者現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)場(chǎng)景而言，比色法試劑盒乃是極為實(shí)用的工具。
劣勢(shì)：干擾多、精度有限
然而老張同樣概括出了幾條經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，其一，樣品之顏色、濁度以及pH值皆有可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾，其二，比色法的靈敏程度存在局限，低濃度樣品的檢測(cè)誤差會(huì)相對(duì)較大，其三，不同批次試劑盒之間的穩(wěn)定性，同樣是需要去進(jìn)行驗(yàn)證的。
他列舉了一個(gè)事例，在今年四月份的時(shí)候，他協(xié)助朋友去測(cè)定一批發(fā)酵液之中的還原糖，該樣品自身呈現(xiàn)為深褐色，運(yùn)用試劑盒測(cè)定出來的數(shù)值顯著偏高。隨后，他借助活性炭進(jìn)行脫色處理，才獲取到了可信數(shù)據(jù)。
如何選擇比色法試劑盒？老張的四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)
看檢測(cè)范圍與樣品匹配
老張講，在購買試劑盒以前，務(wù)必要弄明白自身樣品的濃度范圍。存在一些試劑盒，其線性范圍十分狹窄，倘若樣品濃度過高又或者過低，那么結(jié)果均不準(zhǔn)確。他給出建議，要先去做預(yù)實(shí)驗(yàn)，借助標(biāo)準(zhǔn)品摸索一下線性區(qū)間。
看抗干擾能力
老張?jiān)谖逶路莸臅r(shí)候，對(duì)三個(gè)廠家的總蛋白試劑盒做了對(duì)比，這三個(gè)廠家是不同品牌采用比色法的試劑盒，它們抗干擾能力差別極大，其中有一個(gè)對(duì)脂肪族類物質(zhì)格外敏感，極易出現(xiàn)假陽性。之后他選了一個(gè)有專門標(biāo)注“適用于復(fù)雜樣品”的試劑盒，效果實(shí)實(shí)在在好了許多。
看操作復(fù)雜度
存在一些試劑盒，其使用時(shí)有著加熱的必要、有著避光的要求、有著精確控制時(shí)間的規(guī)定，操作愈是復(fù)雜，人員操作所產(chǎn)生的誤差便會(huì)愈發(fā)大。老張此刻在挑選試劑盒呀，優(yōu)先去尋覓那些操作步驟少的、能在室溫下進(jìn)行反應(yīng)的、顯色頗具穩(wěn)定性的種類。
看批次間穩(wěn)定性
如果是長期項(xiàng)目，他特意提醒，最好一次性買足所需數(shù)量的試劑盒，因?yàn)橥萎a(chǎn)品一致性更好。對(duì)于不同批次的試劑盒，使用前一定要做對(duì)照驗(yàn)證。
老張的今天：從踩坑到經(jīng)驗(yàn)輸出
此刻，老張于實(shí)驗(yàn)室之中專為構(gòu)建了一套關(guān)乎比色法試劑盒的運(yùn)用流程。每一步驟的操作要點(diǎn)，以及注意事項(xiàng)，還有異常處理方案，均被撰寫成標(biāo)準(zhǔn)操作文件。上個(gè)月，他針對(duì)公司的新員工開展了一回培訓(xùn)，特意講授“比色法試劑盒的正確開啟方式”。
曾經(jīng)他講，我往昔以為試劑盒乃是那種傻瓜式的工具，直至如今才明白，工具越是簡易，對(duì)于使用者的要求反倒越高。唯有明晰它的原理以及限制，才能夠切實(shí)將其用好。
倘若你也正處于使用或者打算使用比色法試劑盒的狀態(tài)之中，滿心期望老張的這段經(jīng)歷能夠?qū)δ惝a(chǎn)生一定的助力作用。請(qǐng)務(wù)必牢記，任何一種檢測(cè)方法都必然存在著它自身所固有的邊界范圍，既切莫盲目地去堅(jiān)信，也不可輕易地予以否定，唯有尋找到契合自身樣品特點(diǎn)的方法，這才是解決問題的最為根本的關(guān)鍵要旨所在。
