我的朋友老李，一個(gè)在第三方基因檢測(cè)公司干了五年的“老手”
往前數(shù)，到上周三的那個(gè)下午時(shí)期，我才剛剛從實(shí)驗(yàn)室里面出來(lái)，緊接著手機(jī)就開(kāi)始震個(gè)不停。仔細(xì)查看一下，發(fā)現(xiàn)是老李發(fā)出來(lái)的消息。他給我發(fā)送了一條語(yǔ)音，那語(yǔ)音之中的語(yǔ)氣帶著點(diǎn)滴興奮的意味，表述為：“兄弟哥們，我總算是成功把那個(gè)試劑盒存在的坑里給填滿(mǎn)填平了，這一回選擇是正確無(wú)誤的，效率出現(xiàn)了翻倍的情況?！?。
我在前年一次行業(yè)沙龍上認(rèn)識(shí)了老李，他在杭州一家第三方醫(yī)學(xué)檢測(cè)機(jī)構(gòu)擔(dān)任技術(shù)主管，他們?cè)摴局饕薪又黝?lèi)疾控以及農(nóng)業(yè)部門(mén)的樣本檢測(cè)任務(wù)，PCR核酸檢測(cè)試劑盒屬于他們實(shí)驗(yàn)室所用之物像“口糧”一樣，幾乎每天都要使用。
有個(gè)叫老李的人，做事情特別愛(ài)較真，還熱衷于鉆研。前些日子，他為了挑選出一款恰當(dāng)?shù)腜CR核酸檢測(cè)試劑盒，整整耗費(fèi)了兩個(gè)月時(shí)間來(lái)糾結(jié)，期間還遭遇過(guò)挫折。就在今天，他心甘情愿地將自己曾經(jīng)踩過(guò)的坑以及總結(jié)出來(lái)的經(jīng)驗(yàn)毫無(wú)保留地講出來(lái)，我認(rèn)為這極具價(jià)值，所以就把它寫(xiě)下來(lái)分享給你。
為什么選對(duì)PCR核酸檢測(cè)試劑盒，比選對(duì)設(shè)備還關(guān)鍵？
相當(dāng)多的人持有這樣一種看法，那就是進(jìn)行分子檢測(cè)的時(shí)候，只要機(jī)器配備齊全了，其余所需要的便唯有耗材而已。然而老李卻表明，這是一種極其危險(xiǎn)的認(rèn)知方面的錯(cuò)誤觀(guān)念。
“機(jī)器是骨架，試劑盒才是靈魂?！崩侠钤陔娫?huà)里跟我強(qiáng)調(diào)。
實(shí)驗(yàn)室是他所在之處，日均處理樣本量超三千份，高峰時(shí)超過(guò)一萬(wàn)份。要是PCR核酸檢測(cè)試劑盒的靈敏度差些許，或者特異性差些許，便會(huì)致使大量樣本需再次檢驗(yàn)，不但耗費(fèi)人力、物力，而且會(huì)延遲出具報(bào)告的時(shí)間周期。
客戶(hù)催促得十分緊迫，疾控那邊正等待著結(jié)果，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部會(huì)承受非常巨大的壓力。所以，挑選對(duì)一款具備穩(wěn)定特性，又有著高效表現(xiàn)，同時(shí)兼容性良好的試劑盒，直接決定了實(shí)驗(yàn)室的生死存亡情況。
老李踩的第一個(gè)坑：盲目追求低價(jià)，結(jié)果復(fù)檢率飆升
今年三月，公司采購(gòu)部門(mén)，采取降本舉措，更換了 PCR 核酸檢測(cè)試劑盒，此試劑盒價(jià)格比常用品牌低近三成。
那個(gè)時(shí)候，老李稍微有了些遲疑，然而采購(gòu)方面所給出的數(shù)據(jù)表明性能參數(shù)大致相同，他沒(méi)辦法直接去進(jìn)行反對(duì)。
結(jié)果第一批樣本上機(jī)跑完，問(wèn)題就暴露了。
部分弱陽(yáng)性樣本的.Ct值直接深陷卡死在臨界線(xiàn)的邊緣地帶，致使內(nèi)標(biāo)曲線(xiàn)飄移得背離正軌甚至離譜到極點(diǎn)去了，根本沒(méi)有辦法在精準(zhǔn)無(wú)誤的前提下進(jìn)行判讀，老.李回想提及起來(lái)的時(shí)候仍然還有些許后怕的感覺(jué)存在。
那夜晚間，他領(lǐng)著兩名技術(shù)員持續(xù)工作直至凌晨三點(diǎn)，堅(jiān)決地將那一批次的三百多份樣本逐個(gè)重新進(jìn)行提取，再重新予以擴(kuò)增一遍。最終報(bào)告比所承諾的時(shí)間晚了十個(gè)小時(shí)，客戶(hù)盡管未曾展開(kāi)投訴行為，然而其臉色已然變得十分難看了。
把“慎用”的標(biāo)簽，最終打在了那個(gè)批次的PCR核酸檢測(cè)試劑盒上，是老李打的，之后退回倉(cāng)庫(kù)。
折騰一個(gè)月后，他總結(jié)出三條硬性選型標(biāo)準(zhǔn)
經(jīng)歷那次車(chē)輛側(cè)翻現(xiàn)象以后，老李特地耗費(fèi)了兩周時(shí)長(zhǎng)，針對(duì)市面上占據(jù)主要地位的五款PCR核酸檢測(cè)的試劑盒展開(kāi)了詳盡的對(duì)照檢測(cè)，依據(jù)他自身實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際狀況，歸納總結(jié)出了三條核心的選型標(biāo)準(zhǔn)。
第一條：兼容性必須夠廣
老李講，他們實(shí)驗(yàn)室里的核酸提取儀品，牌并非統(tǒng)一，存在進(jìn)口的，也有國(guó)產(chǎn)的。要是一款PCR核酸檢測(cè)試劑盒，僅僅是針對(duì)某一種提取試劑，或者是某一款提取儀，那么在排班調(diào)度方面，就會(huì)顯得極為被動(dòng)。
他之后所選定的那款試劑盒，其說(shuō)明書(shū)上面嚴(yán)格清晰地標(biāo)明了能夠與市面上超出十五種平常常見(jiàn)的核酸提取試劑以及平臺(tái)相兼容。老李親自以三種最為常用的提取方案開(kāi)展做出了交叉驗(yàn)證，擴(kuò)增后的效率呈現(xiàn)一致的狀況，由此這才安心放心。
老李講，那種兼容性欠佳的試劑盒，會(huì)將人死死捆住，做檢測(cè)的人內(nèi)心最為懼怕的，便是流程變得刻板僵化。
第二條：抗干擾能力要強(qiáng)
樣本類(lèi)型多種多樣，有的是咽拭子形態(tài)，有的呈現(xiàn)痰液狀態(tài)，另外還有像土壤或者水體這樣的環(huán)境樣本。這些樣本之中常常含有各類(lèi)抑制物，要是PCR核酸檢測(cè)試劑盒的抗干擾能力不足夠，極易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
老李特地針對(duì)一批已知的、被界定為具有“難處理”特性的待研究樣本，其中涵蓋了粘液含量較高的咽拭子以及含腐殖酸數(shù)量較多的土壤樣本，開(kāi)展了測(cè)試工作。他最終所選定的那一款試劑盒，于這些樣本當(dāng)中呈現(xiàn)出來(lái)的表現(xiàn)情形，和標(biāo)準(zhǔn)樣本二者間幾乎不存在差異，是這樣一種狀況。
老李嘆息著說(shuō)，進(jìn)行質(zhì)量測(cè)定，最為關(guān)鍵點(diǎn)的是得出的結(jié)論精準(zhǔn)無(wú)誤，減少一個(gè)呈現(xiàn)虛偽的陰性結(jié)果，便能夠減少一條逃脫法網(wǎng)的不法分子流竄出去這種情形發(fā)生。
第三條：冷鏈穩(wěn)定性要過(guò)硬
新手很容易忽略這一點(diǎn)，PCR核酸檢測(cè)試劑盒一般得在零下二十度保存，然而于實(shí)際物流以及實(shí)驗(yàn)室日常使用期間，難以避免會(huì)碰到溫度波動(dòng)的情況。
老李講，其先前使用過(guò)一款試劑盒，于運(yùn)輸途中，因保溫箱的冰袋出現(xiàn)融化情況一次，導(dǎo)致溫度短暫上升至零度以上，抵達(dá)實(shí)驗(yàn)室之后迅即放進(jìn)冰箱，然而再次使用時(shí)，擴(kuò)增效率顯著下降。
他最后挑選的那一款，廠(chǎng)家清楚明白地做過(guò)凍融穩(wěn)定性測(cè)試，能夠承受最少五次凍融循環(huán)，卻不會(huì)對(duì)性能產(chǎn)生影響。這對(duì)于常常需要進(jìn)行分裝使用的實(shí)驗(yàn)室來(lái)講，實(shí)在是相當(dāng)重要。
從翻車(chē)到穩(wěn)定，老李的實(shí)驗(yàn)室終于跑順了
此刻，老李所擁有的實(shí)驗(yàn)室已然毫無(wú)遺留地將那款歷經(jīng)他嚴(yán)謹(jǐn)且苛刻測(cè)試流程的PCR核酸檢測(cè)試劑盒進(jìn)行了全面細(xì)致的更換。就在上個(gè)月，他們?cè)趩稳罩兴苓_(dá)成的最高檢測(cè)數(shù)量成功突破抵達(dá)了1.2萬(wàn)份之多，而復(fù)檢的比率從先前所處之百分之五大幅下降轉(zhuǎn)變至百分之一以下的程度。
電話(huà)里，老李笑著，跟我說(shuō) ，當(dāng)下做擴(kuò)增曲線(xiàn) ，看著那呈標(biāo)準(zhǔn)狀的S型曲線(xiàn) ，心里著實(shí)踏實(shí)了許多。
他專(zhuān)門(mén)著重指出，這款試劑盒的擴(kuò)增時(shí)長(zhǎng)相較于傳統(tǒng)產(chǎn)品減少了差不多二十分鐘之多，不要小瞧這二十分鐘，對(duì)于一天要處理數(shù)量上萬(wàn)份樣本的實(shí)驗(yàn)室來(lái)講，意味著每天能夠多出一輪擴(kuò)增次數(shù)，使整體效率提高百分之二十以上。
如果你也在為選型發(fā)愁，不妨參考老李的“笨辦法”
老李講，不存在那種一鍵達(dá)成的最優(yōu)解決辦法，有的只是最適配自身實(shí)驗(yàn)室情況的PCR核酸檢測(cè)試劑盒。
他所采用的辦法極為簡(jiǎn)單，那便是，在拿到樣品之后，切莫僅僅去查看參數(shù)表，務(wù)必要進(jìn)行真機(jī)實(shí)際測(cè)試。運(yùn)用自身實(shí)驗(yàn)室最為常用的樣本類(lèi)型，借助自身的提取儀，以及自身的擴(kuò)增儀，運(yùn)行一個(gè)完整的流程，依靠查看數(shù)據(jù)來(lái)講明情況。
廠(chǎng)家所撰寫(xiě)的是參數(shù)表，可自己進(jìn)行操作跑出來(lái)的是擴(kuò)增曲線(xiàn)。老李講出的這句話(huà)，我把它記在了心里。
要是你同樣從事分子檢測(cè)工作，正為怎樣挑選一款沒(méi)毛病的PCR核酸檢測(cè)試劑盒而犯愁，那就不妨去嘗試一下老李的這個(gè)辦法。多留出幾天時(shí)間來(lái)做驗(yàn)證，這可比之后耗費(fèi)幾個(gè)月時(shí)間去填補(bǔ)漏洞強(qiáng)多了。
期待這篇文章能夠?yàn)槟銕バ┰S啟發(fā)，要是你也曾遭遇過(guò)類(lèi)似的翻車(chē)狀況，又或者擁有更為出色的選型經(jīng)驗(yàn)，歡迎收藏此文章，往后慢慢去琢磨。
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