在上個月份的時候, 老張所擁有的養(yǎng)豬場地, 最終順利地實現了通過一次突擊性質的檢查這一情況。他專門特意地撥打了電話過來, 對著我講了一番話語, 他表示完全是依靠半年之前所更換的那一批PCR核酸檢測試劑盒, 不然的話, 在這次的情況下, 肯定是要陷入失敗境地的。
老張是我相識超十年的友人, 于山東濰坊操持一家存欄量常年大體維系在兩千頭左右之中型種豬場。從業(yè)此領域者明白, 豬場極懼傳染病, 特別是非洲豬瘟。一旦有跡象顯現, 往往便是成百上千萬之損失。
去年的那個冬天, 老張碰到了一件能使他陷入焦頭爛額狀況的事情, 在11月中旬的時候, 他場內那一批等待出欄的育肥豬忽然出現毫無緣由的低燒情況, 盡管癥狀并非嚴重無比, 然而他卻不敢有絲毫的疏忽大意, 依照一貫的老規(guī)矩, 他在第一時間聯系了當地的一家第三方檢測機構, 并且連夜進行采樣然后送去檢驗。
那個時候, 進行檢測操作的機構所采用的乃是某一品牌的PCR核酸檢測試劑盒, 當檢測結果呈現出來以后, 顯示的情形為陰性, 老張由此舒緩了一口氣, 心里覺得這只不過是普通的感冒情況因而做出了調整, 對飼料組成配方予以調適之后便沒再加以理會。然而不料, 在時隔一周之后, 同一批次的豬當中有三頭出現了典型的皮膚呈現出青紫色的狀況。
老張的心里頭冒起了嘀咕, 他迅速地跟省里農科院的友人取得聯系, 借調了一套并非同一品牌的PCR試劑盒, 接著又再進一步地重新采樣去做了一次相對照的檢測, 這一回的結果表明, 當中存在2份樣本呈現出弱陽性。
那幾天, 老張回憶起來時, 語氣里帶著后怕, 稱當時自己后背上的感覺都發(fā)涼了。對于同一個樣品, 兩家試劑盒給出的結果并不相同, 那么究竟該相信誰的結果呢?
為什么同一樣品檢測結果不一樣？
老張后來特地向省農科院的檢測專家進行了請教, 這才弄明白緣由。原本, PCR核酸檢測試劑盒盡管原理是一樣的, 不過不同品牌在引物設計方面, 在酶的活性方面, 以及提取效率方面, 均存有很大的差異。
有的試劑盒, 為了去追求檢測速度, 將核酸提取以及擴增的時間給進行了壓縮, 致使樣本當中濃度比較低的病毒核酸沒辦法被有效地捕獲。老張先前用到的那一款, 是典型的“快檢型”產品, 適宜高濃度樣本的篩查, 然而對于處于潛伏期或者有低載量的樣品而言, 漏檢率顯著較高。
專家告知老張, 挑選PCR核酸檢測試劑盒時, 不能單單依據價格以及檢測速度來抉擇, 更得著重留意一項核心指標, 這個核心指標就是靈敏度。靈敏度不足的試劑盒, 宛如戴著濾鏡去觀測病毒, 很容易將真相覆蓋住。
PCR核酸檢測試劑盒靈敏度怎么選？
受專家建議影響, 老張著手對市面上的檢測產品展開重新評估, 他獲取了三家主流供應商所提供的試劑盒, 而后將它們分別予以對比測試。
歸屬于第一家的產品, 其檢測下限被標明為每反應100拷貝, 老張運用該產品去檢測已知呈陽性的稀釋樣本, 最終結果是在超過80拷貝之后便開始呈現出不穩(wěn)定的狀況。
屬于第二家的那些產品, 其檢測下限被標注成是每反應五十拷貝, 實際呈現的狀況稍微要好一點兒, 然而在接連進行的三次重復實驗當中, 有一回出現了假陰性的情況。
那第三家, 是省農科院給推薦的某一個品牌, 其檢測下限所標注的是每反應20拷貝。老張, 運用同一批被稀釋的樣本去進行測試, 三次重復下來, 全部都準確無誤地識別出了陽性, 甚至, 就算處在10拷貝每反應的低濃度狀況之下, 依舊存在著微弱的信號。
老張講道, 那次對比實驗使得我徹徹底底地弄清楚了, PCR核酸檢測試劑盒的靈敏度, 直接對檢測結果的可靠性起到了決定作用。他在當時馬上就作出了決定, 將豬場后續(xù)的檢測業(yè)務全部更替成了那家靈敏度更高的產品。
不同場景怎么選PCR核酸檢測試劑盒？
關于選試劑盒, 老張如今有了他自己摸出的門道和體會。他跟我講, 得按照不一樣的使用情形去進行搭配。
對于日常的進場車輛, 以及人員, 還有環(huán)境拭子的監(jiān)測而言, 能夠采用中等靈敏度的試劑盒, 其成本相對比較低, 并且檢測速度也快, 還可以做到每天一次進行定期篩查。
然而要是針對疑似發(fā)病豬只的個體進行檢測, 特別是在存在需要去做追蹤確診的狀況時, 那就一定要采用高靈敏度的PCR核酸檢測試劑盒。這是鑒于在如此這般的情形下, 病毒載量有可能極其低, 倘若出現漏檢, 便會致使全群擴散。
沒法子, 從事我們這個行當的, 一次差錯說不定就是幾十萬的虧損。試劑盒價格高些, 然而換來的是放心。老張講這番話之際, 身處豬場的檢測室里, 注視著新一批的檢測結果。
用PCR試劑盒常見的坑有哪些？
這半年里, 老張所踩過的坑, 他進行了總結, 得出了幾條, 囑咐我務必寫出來, 告知同行們。
第一個坑乃是僅僅關注品牌卻不留意批次, 某些大品牌的同一試劑盒, 不同批次的穩(wěn)定性存在著差異, 老張給出建議，每當迎來一個新批次, 務必要借助已知的陽性標準品去做一回驗證, 在確認沒有問題之后才能夠大規(guī)模地予以使用。
第二個坑在于遺漏了運輸以及保存條件, PCR核酸檢測試劑盒當中的酶還有引物極為脆弱, 要是運輸環(huán)節(jié)之中溫度超過標準, 又或者保存的時候反復進行凍融, 試劑盒于此處方面的的活性速度會迅速下降, 老張當下每次貨物到達的時候就會檢察以及核對冷鏈記錄, 并且于試劑盒之上標記以及備注好開封日期還有凍融次數。
處于緊接著第二個坑之后的第三個坑, 乃是存在著過度依賴試劑盒附帶的說明書這種情況。老張察覺到, 有一些試劑盒所推薦的擴增程序, 在自己家中所使用的檢測儀器上運行之后呈現出來的結果, 并不盡如人意。后來, 每當他拿到全新品牌的試劑盒時, 都會率先去開展一回梯度實驗, 將退火溫度以及循環(huán)次數調節(jié)至最為適宜的參數。
老張總結說, 檢測這件事, 人起到的作用占一半功勞, 機器同樣占一半功勞, 而另一半功勞要看試劑盒是不是能依靠, 是否可靠。
老張現在怎么選PCR核酸檢測試劑盒？
我在剛過去的上周, 前往老張所擁有且經營的豬場, 實實在在地去查看了一番。他那里的檢測室, 空間著實不算大, 然而設備配備卻十分齊全, 有著一臺熒光定量的這種PCR儀, 還有一臺用于核酸提取的儀器, 另外還有一冰箱, 里面放置的試劑盒排列得整整齊齊的。
他把冰箱門給拉開了, 而后指著一排包裝箱講道: “如今我僅僅是固定使用兩個品牌, 其中一個用來做日常監(jiān)測, 另一個用來做診斷復核。這兩個品牌我都做過穩(wěn)定性跟蹤, 且所跟蹤的時長至少在三個月以上, 靈敏度的數據全部是建立過檔案的?！?。
他又講給我知曉，現下在行業(yè)范圍里面, 越來越多數量的人已經著手去留意PCR核酸檢測試劑盒的生產資質這一方面以及出廠質控數據這一方面了。那些能夠予以完整呈現第三方檢測報告的, 在出廠前期做過不少于三次獨立進行驗證操作的品牌, 通常來講是更具備值得被信賴屬性的一種選擇。
這其中, 特別是從事動物檢疫工作的人員得出的結果, 其直接關聯到能否順利開具證明, 以及能否順利歷經各級檢查, 且一個符合標準的PCR核酸檢測試劑盒, 不僅需要具備精準度, 還必須擁有穩(wěn)定性, 要在任何狀況下都能夠為你遞送令人信賴靠得住的理想結果。老張在闡述這些內容的時候, 態(tài)度極其認真有且是十分嚴肅的表述著。
兩個月之前, 老張豬場周邊有一家養(yǎng)殖場出現了疫情, 當地畜牧部門要求方圓五公里以內所有豬場開展緊急檢測, 老張拿出了自己的檢測室以及那批高靈敏度的PCR核酸檢測試劑盒, 三天之內完成了全場兩千頭豬的分批檢測, 結果全部為陰性, 這使得他順利拿到了通行證, 也保住了即將出欄的這批豬。
出欄那批育肥豬時, 光利潤就達四十多萬, 老張一算完賬笑著講, 所以你瞧, 投資在PCR核酸檢測試劑盒上的那點資金, 真算不上什么。
就講到這兒了, 老張的故事。于他的經歷之中, 我所學到的最為關鍵的一件事情即: 于動物檢疫此項事務之上, 關于PCR核酸檢測試劑盒的挑選并非成本層面的問題, 而是風險管理所要考量的問題。倘若選對一款可靠的試劑盒, 便如同給自身的養(yǎng)殖場安裝上了一道防火墻。
