這篇文章能幫你省下不少實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)
老張是我于生物公司搞研發(fā)之際結(jié)識(shí)的友人, 專(zhuān)門(mén)從事免疫檢測(cè)工作將近十年, 其中最令人頭疼的便是挑選 ELISA 試劑盒。他時(shí)常講, 一旦選錯(cuò)了試劑盒, 不但實(shí)驗(yàn)白搭、數(shù)據(jù)難看, 而且老板還會(huì)緊追著索要結(jié)果, 那種滋味著實(shí)不好受。有時(shí)某個(gè)項(xiàng)目卡在檢測(cè)階段, 需要連續(xù)加班去補(bǔ)數(shù)據(jù), 簡(jiǎn)直能把人逼到發(fā)瘋。這篇文章我借助老張的親身經(jīng)歷, 來(lái)跟你講講怎樣選對(duì) ELISA 檢測(cè)試劑盒, 期望對(duì)正遭受實(shí)驗(yàn)折磨的你能有一些幫助。
ELISA檢測(cè)試劑盒到底該咋選
去年, 老張換到一家從事腫瘤標(biāo)志物研究的公司, 在那里負(fù)責(zé)一個(gè)關(guān)于癌胚抗原的檢測(cè)項(xiàng)目。項(xiàng)目啟動(dòng)之前, 他專(zhuān)門(mén)花了兩周的時(shí)間, 去調(diào)研各種各樣的ELISA試劑盒。市面上試劑盒的牌子眾多, 價(jià)格狀況紊亂, 參數(shù)復(fù)雜多樣, 僅僅依靠查看宣傳頁(yè), 根本沒(méi)有辦法分辨出好壞。老張剛開(kāi)始的時(shí)候, 也被弄得暈頭轉(zhuǎn)向, 后來(lái)他總結(jié)出了一個(gè)原則: 不要只去看價(jià)格, 而是要看你所檢測(cè)的樣本類(lèi)型與靈敏度是不是相匹配。比如說(shuō)血清樣本和血漿樣本, 對(duì)于試劑盒的基質(zhì)要求就是不一樣的, 要是選錯(cuò)了, 那么背景可能會(huì)高得出奇。
怎么判斷ELISA檢測(cè)試劑盒靠不靠譜
老張講, 判定一個(gè)試劑盒靠不靠譜, 最直接的法子便是看它的標(biāo)曲以及質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。他記著有一回, 被一個(gè)進(jìn)口品牌試劑盒漂亮的標(biāo)曲數(shù)據(jù)所吸引, 然而實(shí)際操作時(shí), 標(biāo)曲斜率不斷地反復(fù)漂移, 致使定量偏差極為大。后來(lái)他換用了某個(gè)國(guó)產(chǎn)品牌的試劑盒, 標(biāo)曲重現(xiàn)性反倒更為穩(wěn)定。他對(duì)我說(shuō), 別盲目迷信進(jìn)口, 許多國(guó)產(chǎn)品牌如今質(zhì)量真的一點(diǎn)也不差, 并且技術(shù)支撐更為及時(shí)。關(guān)鍵在于要看試劑盒出廠之前有沒(méi)有經(jīng)過(guò)嚴(yán)苛的批次間一致驗(yàn)證。
ELISA檢測(cè)試劑盒選進(jìn)口還是國(guó)產(chǎn)
那會(huì)兒老張剛進(jìn)入行業(yè), 公司有規(guī)定表明項(xiàng)目得采用進(jìn)口試劑盒, 這樣被認(rèn)為能讓人放心。然而后來(lái)他察覺(jué)到, 進(jìn)口試劑盒的貨期有時(shí)格外長(zhǎng), 特別是遭遇促銷(xiāo)或者突發(fā)疫情的狀況時(shí), 一等就要等上一個(gè)月, 致使項(xiàng)目進(jìn)度徹底被耽擱。并且有些進(jìn)口試劑盒說(shuō)明書(shū)里所推薦的稀釋液, 與本地樣本的兼容性并不理想。2024年夏天他接手了一個(gè)緊急項(xiàng)目, 該項(xiàng)目要求在兩周內(nèi)得出結(jié)果, 進(jìn)口試劑盒根本沒(méi)辦法及時(shí)到貨。情形無(wú)奈, 他懷揣著姑且一探的想法, 采用了上海一家公司所生產(chǎn)的國(guó)產(chǎn)ELISA檢測(cè)試劑盒, 隨后, 其結(jié)果數(shù)據(jù)與先前進(jìn)口的作出比較, 差異未達(dá)百分之三。
ELISA檢測(cè)試劑盒如何避免背景過(guò)高
去年十一月, 老張做那一批臨床血清樣本時(shí), 碰到個(gè)特令人頭疼的狀況，背景值高得出奇, 致使陰性對(duì)照跟陽(yáng)性樣本幾乎沒(méi)差別。他排查諸多環(huán)節(jié), 像洗板、孵育溫度、抗體稀釋度等, 均可排除, 最終發(fā)現(xiàn)是試劑盒里的檢測(cè)抗體與樣本里的異嗜性抗體產(chǎn)生了交叉反應(yīng)。他趕忙換了個(gè)添加特殊封閉劑的ELISA檢測(cè)試劑盒, 背景值瞬間降了下來(lái)。故而選試劑盒時(shí), 務(wù)必要查看說(shuō)明書(shū)里有無(wú)提及異嗜性抗體阻斷技術(shù), 特別是做臨床樣本時(shí), 此步驟相當(dāng)關(guān)鍵。
ELISA檢測(cè)試劑盒的保存與效期管理
張老頭曾有一回因沒(méi)留意試劑盒的保存條件, 把價(jià)值不低的一盒試劑盒置于室溫下超兩小時(shí), 致使里面的酶標(biāo)抗體活性大幅降低, 整批實(shí)驗(yàn)全報(bào)廢了。自那之后, 他給實(shí)驗(yàn)室定了個(gè)規(guī)矩: 所有ELISA檢測(cè)試劑盒到貨后, 馬上按說(shuō)明書(shū)要求分裝保存, 四攝氏度冷藏的絕不放進(jìn)冷凍室, 是冷凍的也別反復(fù)凍融。他還用Excel做了效期追蹤表, 提前一個(gè)月提醒臨近效期的試劑盒, 優(yōu)先去使用。他講道, 即便試劑盒價(jià)格高昂之至, 然而卻根本無(wú)法比得上涉及時(shí)間及人力方面所產(chǎn)生的成本, 千萬(wàn)不要于這些細(xì)微環(huán)節(jié)之上出現(xiàn)失誤狀況。
ELISA檢測(cè)試劑盒的批次穩(wěn)定性有多重要
今年三月份的時(shí)候, 老張被安排去參與一個(gè)多中心合作項(xiàng)目, 這個(gè)項(xiàng)目要求連續(xù)的三個(gè)月運(yùn)用同一批次的 ELISA 檢測(cè)試劑盒來(lái)檢測(cè)兩千多份樣本。老張?zhí)匾庠谥熬拖驈S家預(yù)訂了四個(gè)批次的試劑盒, 而且還做了批次間一致性測(cè)試。測(cè)試結(jié)果顯示, 有兩個(gè)批次的標(biāo)曲平均熒光熒光強(qiáng)度相差了將近百分之十, 要是直接投入使用的話, 后期數(shù)據(jù)分析肯定會(huì)出現(xiàn)大問(wèn)題。老張馬上跟廠家進(jìn)行溝通要求換貨, 廠家也承認(rèn)這是生產(chǎn)過(guò)程里的包被工藝波動(dòng)造成的。因此, 要是你所開(kāi)展的是長(zhǎng)久時(shí)間段的、或者是多個(gè)批次的對(duì)比性質(zhì)的研究工作, 那么最好是一次性就充足地準(zhǔn)備好處于同一個(gè)批次的試劑盒, 或者是向廠家提出要求, 讓其提供批次之間的驗(yàn)證報(bào)告。
ELISA檢測(cè)試劑盒的靈敏度怎么判斷
老張存在一位同事, 這位同事從事細(xì)胞因子檢測(cè)工作, 這位同事始終不停地抱怨一款ELISA檢測(cè)試劑盒, 抱怨其靈敏度欠缺不足夠, 總是無(wú)法檢測(cè)出那些低濃度的樣本。老張向這位同事給出建議, 建議這位同事先仔細(xì)看明白試劑盒的檢測(cè)下限, 并非是說(shuō)明書(shū)上所書(shū)寫(xiě)的那個(gè)理論數(shù)值, 而是實(shí)際上在實(shí)驗(yàn)室條件狀況下能夠穩(wěn)定檢測(cè)出來(lái)的最低濃度數(shù)值。老張自身曾經(jīng)對(duì)一款國(guó)產(chǎn)品牌的IL - 6試劑盒進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證, 該試劑盒說(shuō)明書(shū)顯示檢測(cè)下限是零點(diǎn)五皮克每毫升, 然而老張實(shí)際操作完成后發(fā)現(xiàn), 在一點(diǎn)零皮克每毫升以下的時(shí)候, 變異系數(shù)就已然超過(guò)百分之二十了。所以在挑選試劑盒之際, 最好朝著廠家去索要一份切實(shí)的靈敏度驗(yàn)證數(shù)據(jù), 而不要僅僅只是去看宣傳。
選對(duì)試劑盒，實(shí)驗(yàn)省心一大半
被稱(chēng)作檢測(cè)高手的老張, 如今在崗單位范圍之內(nèi), 實(shí)則是將挑選 ELISA 檢測(cè)試劑盒的諸多坑都逐一踩過(guò), 之后才老老實(shí)實(shí)地去總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。他時(shí)常會(huì)跟初來(lái)乍到的同事言明, 切莫把時(shí)間耗費(fèi)在不靠譜的試劑盒那頭, 一回實(shí)驗(yàn)遭遇失敗, 所浪費(fèi)的可不單單是試劑, 還有你的精力以及項(xiàng)目進(jìn)度。在挑選試劑盒之先, 多加花費(fèi)半天的時(shí)間去瞧瞧說(shuō)明書(shū)、技術(shù)參數(shù)與用戶(hù)評(píng)價(jià), 相比于盲目下單可要?jiǎng)澦阍S多。期望老張的這段經(jīng)歷能夠令你少走些彎路, 盡早得出很漂亮的數(shù)據(jù)。
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