這篇文章能幫你什么
知曉做實(shí)驗(yàn)的友人都清楚, 若能選對(duì) ELISA 試劑盒, 那么實(shí)驗(yàn)便成功了半數(shù)。然而在市面上, 品牌數(shù)量眾多, 參數(shù)紛繁復(fù)雜令人目眩, 稍有不慎就會(huì)掉入陷阱。此篇文章憑借一位朋友的親身經(jīng)歷, 告知你在選型之際最應(yīng)該查看什么、最應(yīng)當(dāng)避開(kāi)什么, 全部都是實(shí)際操作中的實(shí)用干貨。
朋友老李的實(shí)驗(yàn)困境
有個(gè)叫老李的人,是我于生物公司結(jié)識(shí)的老朋友, 從事免疫檢測(cè)這項(xiàng)研究差不多快十年了。去年夏天的時(shí)候, 他承接了一個(gè)規(guī)模較大的項(xiàng)目, 此項(xiàng)目的任務(wù)是檢測(cè)一批樣本里細(xì)胞因子的濃度。該項(xiàng)目周期緊張, 樣本數(shù)量眾多, 領(lǐng)導(dǎo)催促得很急切。老李起初的時(shí)候還蠻有自信, 畢竟他有著豐富的經(jīng)驗(yàn)。
可出乎預(yù)料的是, 在第一批實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)呈現(xiàn)出來(lái)之后, 他瞬間愣住。標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的程度十分糟糕, 重復(fù)的孔之間CV值高到了令人匪夷所思的地步, 空白的孔背景值同樣偏高。老李重復(fù)多次仔細(xì)核對(duì)操作的步驟, 核實(shí)移液器校準(zhǔn)不存在差錯(cuò), 孵育的時(shí)間以及溫度也全是嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)去進(jìn)行操作的, 然而問(wèn)題仍舊存在。
他為什么走了彎路
老李起初貪圖省事, 選了市面里價(jià)格最為低廉的一款ELISA試劑盒 , 他跟我講, 那時(shí)所想的是反正都是針對(duì)同一個(gè)指標(biāo)做檢測(cè), 能夠節(jié)省費(fèi)用便盡量節(jié)省 , 結(jié)果怎樣呢? 試劑盒的靈敏度欠佳, 濃度處于較低水平的樣本差不多檢測(cè)不出信號(hào) , 并且批次之間的穩(wěn)定性十分糟糕, 同一批樣本運(yùn)用了兩個(gè)不一樣批號(hào)的試劑盒, 數(shù)據(jù)不相一致。
那一階段老李承受著極大壓力, 項(xiàng)目時(shí)間被延后, 上級(jí)接連不停對(duì)他予以催促, 致使他夜晚難以入眠, 躺在床上輾轉(zhuǎn)反側(cè)反復(fù)進(jìn)行思考究竟問(wèn)題出在了哪里。隨后他向一位于行業(yè)內(nèi)主營(yíng)質(zhì)量控制范疇的資深專家進(jìn)行求教, 那個(gè)人僅用一句話便讓他豁然開(kāi)朗明白了, 對(duì)于ELISA試劑盒進(jìn)行選型, 關(guān)鍵要考察三個(gè)指標(biāo), 分別是靈敏度, 特異性, 還有批間差。
重新選型后的轉(zhuǎn)機(jī)
老李在經(jīng)歷痛苦后冷靜下來(lái)反思, 進(jìn)而展開(kāi)了針對(duì)不同品牌的ELISA試劑盒的系統(tǒng)比較, 他耗費(fèi)壹周的時(shí)間, 認(rèn)真地研究了各個(gè)品牌所附帶的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū), 著重聚焦于靈敏度范圍、交叉反應(yīng)率、批間CV值這些起到關(guān)鍵作用的參數(shù), 與此同時(shí), 他特意地去查詢了同行所發(fā)表的文獻(xiàn), 以此用以了解大家究竟使用的是哪類(lèi)品牌。
他再度挑選了一款口碑優(yōu)良、參數(shù)明晰的ELISA試劑盒, 此次他耗費(fèi)了稍多一些的預(yù)算, 然而實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻全然不同, 標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值達(dá)到了0.998, 重復(fù)孔的CV值被控制在了5%以內(nèi), 空白孔的背景值極低, 最為關(guān)鍵的是, 不同批次的試劑盒用于檢測(cè)同一批樣本時(shí), 數(shù)據(jù)呈現(xiàn)出高度一致性。
項(xiàng)目到底還是順利地推進(jìn)了, 老李長(zhǎng)長(zhǎng)地舒了一口氣。他講了這么個(gè)事兒, 往昔一直覺(jué)著選拔試劑盒純粹就是瞅價(jià)格以及品牌, 直至如今才恍然大悟, 參數(shù)才是真正有說(shuō)服力的關(guān)鍵所在。
老李總結(jié)的三條鐵律
別單單只瞅價(jià)格, 因著便宜的 ELISA 試劑盒常常在抗體純度以及包被工藝方面進(jìn)行偷工減料, 致使數(shù)據(jù)質(zhì)量絕對(duì)沒(méi)有保障 , 其次, 查看說(shuō)明書(shū)得細(xì)致, 靈敏度、檢測(cè)范圍、特異性這樣的參數(shù), 直接對(duì)試劑盒能否令你的實(shí)驗(yàn)需求得以滿足起著決定作用 , 再者, 批次間穩(wěn)定性最為關(guān)鍵, 特別是在開(kāi)展長(zhǎng)期項(xiàng)目或者進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)時(shí), 批次間差異大將會(huì)讓你之前的努力全歸于白費(fèi)。
當(dāng)前, 老李每當(dāng)挑選ELISA試劑盒之際, 都會(huì)先行開(kāi)展一項(xiàng)范圍較小的預(yù)實(shí)驗(yàn)工作, 借助具備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品去驗(yàn)證該試劑盒展現(xiàn)出的實(shí)際表現(xiàn)情況。他聲稱, 耗費(fèi)多出兩天的時(shí)間去進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn), 能夠節(jié)省后續(xù)一個(gè)月因返工所需耗費(fèi)的時(shí)間。
給你的選型建議
倘若你處于為ELISA試劑盒挑選型號(hào)而苦惱煩憂之時(shí), 不妨去效仿老李所采用的辦法。首先要明晰自身的樣本類(lèi)別以及檢測(cè)的指定標(biāo)準(zhǔn), 接著鎖定幾個(gè)占據(jù)主流地位的品牌, 著重去查看它們的靈敏程度范圍以及批次之間的CV數(shù)值。千萬(wàn)不要忘記去查詢查閱同行所創(chuàng)制公布的文獻(xiàn), 思量思索觀察同領(lǐng)域的研究者選用的是何種品牌。最終, 若具備相應(yīng)條件的情況下做一趟初步的預(yù)先實(shí)驗(yàn)去進(jìn)行驗(yàn)證。
要是選對(duì)了 ELISA 試劑盒, 那么實(shí)驗(yàn)成功率便能夠提升一大截。老李如今逢人就講, 以前走過(guò)彎路, 現(xiàn)在才明白選型這個(gè)事情, 真的是不能夠馬虎大意的。期望他的經(jīng)歷能夠助力你在實(shí)驗(yàn)之路上減少踩坑的情況。
可可.jpg)
