去年冬季時(shí)節(jié), 我的老友老趙險(xiǎn)些被一個(gè)細(xì)胞供應(yīng)商害得很慘, 老趙是我于生物技術(shù)領(lǐng)域結(jié)識(shí)將近十年的兄弟, 老趙于上海張江自行開辦了一家規(guī)模較小的藥物篩選外包服務(wù)公司, 此公司專門從事眼科藥物的早期毒性評(píng)估工作, 他的那家公司規(guī)模不大, 然而實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備卻頗為齊全, 在前年的時(shí)候剛剛購(gòu)置了一臺(tái)高端的活細(xì)胞成像系統(tǒng), 這臺(tái)系統(tǒng)專門用以開展兔原代角膜上皮細(xì)胞的藥物滲透實(shí)驗(yàn)。
話說這事兒得追溯到去年10月, 那時(shí)候, 老趙接到了一個(gè)訂單, 此訂單來自蘇州的一家創(chuàng)新藥企, 要對(duì)一款針對(duì)干眼癥的新化合物進(jìn)行測(cè)試, 在測(cè)試過程中需要使用兔原代角膜上皮細(xì)胞去做屏障功能實(shí)驗(yàn)。當(dāng)時(shí), 老趙自己手里所擁有的細(xì)胞庫(kù)存數(shù)量不足, 于是他趕忙聯(lián)系了以前曾經(jīng)合作過的一家提供細(xì)胞的供應(yīng)商。此供應(yīng)商給出的報(bào)價(jià)較為便宜, 還聲稱這些細(xì)胞是從新西蘭兔身上分離出來的, 其純度能夠達(dá)到95%, 老趙當(dāng)時(shí)沒做過多思考就下了訂單。
細(xì)胞到手之后, 老趙即刻察覺到異樣。他在前年于實(shí)驗(yàn)室曾繁育過一批兔原代角膜上皮細(xì)胞, 清楚知曉正常情形下應(yīng)呈現(xiàn)何種形態(tài), 那是如鵝卵石般的圓形, 鋪滿后能夠形成致密的單層。然而此次所收到的細(xì)胞, 在鏡下觀察形態(tài)顯著不同, 部分細(xì)胞長(zhǎng)得類似梭形, 并且存在一些漂浮著的死細(xì)胞。老趙趕忙進(jìn)行了免疫熒光染色, 結(jié)果顯示CK12角蛋白陽(yáng)性率僅為50%多, 這表明這批細(xì)胞中混入了大量成纖維細(xì)胞以及其他雜細(xì)胞。
那幾日, 老趙著急得嘴上起了泡, 訂單交期僅剩下兩周時(shí)間, 重新訂購(gòu)細(xì)胞起碼得等五至七天, 并且倘若再買到不可靠的貨物, 整個(gè)項(xiàng)目便會(huì)失敗, 他后來跟我講, 那段日子他每晚都失眠, 反復(fù)在電腦上查閱兔原代細(xì)胞的供應(yīng)商資料, 查看了不少于二十家公司的產(chǎn)品說明書以及質(zhì)檢報(bào)告。
是在11月5號(hào)出現(xiàn)了轉(zhuǎn)折點(diǎn), 有老趙, 他在行業(yè)微信群當(dāng)中, 看到有一個(gè)同行進(jìn)行推薦, 說存在一家做兔原代細(xì)胞的供應(yīng)商, 其每一批細(xì)胞都附帶第三方檢測(cè)的流式細(xì)胞圖, 并且作出承諾, 將會(huì)在發(fā)貨前24小時(shí)拍一張顯微鏡下的活細(xì)胞照片發(fā)送給客戶來確認(rèn), 老趙懷著試試看的心態(tài)添加了他們的銷售微信, 對(duì)方迅速發(fā)來一份詳細(xì)的質(zhì)檢報(bào)告, 其中涵蓋兔原代角膜上皮細(xì)胞的CK12和p63雙標(biāo)染色結(jié)果, 還有跨膜電阻的檢測(cè)數(shù)據(jù)。
跟我講的老趙, 提及他實(shí)際最為看重的那一點(diǎn), 是兔原代細(xì)胞是不是存在完備的質(zhì)檢體系。之后他向我詳細(xì)解說了三條硬性標(biāo)準(zhǔn),直至如今我都能清晰地記著。
兔原代細(xì)胞如何判斷純度夠不夠
第一首先是純度驗(yàn)證, 老趙往昔曾踩過坑, 知曉一些供應(yīng)商取傳代細(xì)胞或者混合細(xì)胞來充數(shù), 他告知我, 真正的兔原代細(xì)胞需有明確的標(biāo)志物鑒定, 像角膜上皮細(xì)胞要查看CK12及CK3的表達(dá), 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞要查看RPE65和CRALBP, 要是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞, 那就得看Brn3a陽(yáng)性率, 他講當(dāng)下行業(yè)內(nèi)較為認(rèn)可的做法是流式細(xì)胞術(shù)加免疫熒光雙標(biāo), 兩個(gè)結(jié)果能契合才算可以。
兔原代細(xì)胞活率達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求怎么辦
第二點(diǎn)關(guān)乎活率情況, 老趙講那次他所購(gòu)得的細(xì)胞, 進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色查看, 其活率僅為86% , 他告知我, 真正可用于做實(shí)驗(yàn)的兔原代細(xì)胞, 活率起碼要90%以上, 最佳是95%以上。那個(gè)可靠的供應(yīng)商于電話里直接向他展示了過去三個(gè)月的質(zhì)檢記錄, 每批細(xì)胞的活率皆穩(wěn)定處于94%至97%之間, 并且每批都附帶了臺(tái)盼藍(lán)染色的顯微鏡照片以及Countess細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的結(jié)果截圖。老趙當(dāng)時(shí)便稱, 這份具備透明化特質(zhì)的質(zhì)檢數(shù)據(jù), 比任何口頭承諾都更具說服力。
兔原代細(xì)胞運(yùn)輸中會(huì)影響功能嗎
關(guān)鍵意義更為突出的第三點(diǎn)是, 運(yùn)輸以及時(shí)效方面。老趙過后跟我講述, 兔原代細(xì)胞與細(xì)胞系有所不同, 其格外嬌弱, 從分離直至接種的時(shí)間范圍極為短暫。那家具備可靠性的供應(yīng)商所采用的是專門用于細(xì)胞運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)基, 并且添加了抗氧化劑以及營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑, 發(fā)貨之際運(yùn)用雙層保溫箱附加冰袋, 確保在48小時(shí)之內(nèi)實(shí)現(xiàn)送達(dá)。老趙從蘇州訂購(gòu)的那一批貨物, 從下達(dá)訂單開始直至細(xì)胞抵達(dá)實(shí)驗(yàn)室, 總共計(jì)時(shí)僅僅使用了26個(gè)小時(shí), 開啟箱子時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基的顏色仍舊呈現(xiàn)為正常的粉紅色, pH值不存在問題。
老趙運(yùn)用這批兔原代角膜上皮細(xì)胞開展了, 完整的屏障功能實(shí)驗(yàn), 他告知我, 細(xì)胞被接種到Transwell小室后, 第三天跨膜電阻穩(wěn)定在了800 Ω·cm2 以上, 相較于之前那批雜細(xì)胞, 強(qiáng)出了不止一個(gè)量級(jí), 最終實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)極為出色, 那家蘇州藥企的制劑部門主管親自致電過來夸贊他數(shù)據(jù)堅(jiān)實(shí)。
如今, 老趙所在的公司已然成為了那家供應(yīng)兔原代細(xì)胞的供應(yīng)商的經(jīng)時(shí)長(zhǎng)年合作的客戶, 他每一次進(jìn)行貨物采購(gòu)的時(shí)候, 都會(huì)預(yù)先查看一番對(duì)方給出的批次質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告, 如此心里才會(huì)覺得安穩(wěn)踏實(shí)。上個(gè)月, 我們一同共進(jìn)餐食, 他仍舊有所感觸地講, 挑選兔原代細(xì)胞供應(yīng)商這件事情, 就如同找尋相親對(duì)象一般, 外型看上去大致相近的, 其內(nèi)在的差別可就大得沒邊了。
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