公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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PBCV DNA連接酶 |
1250U |
A-PJ1093 |
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PBCV DNA連接酶 |
5KU |
A-PJ1093 |
描述： PBCV DNA 連 接酶 也稱為 SplintR 連接酶 或 Chorella 病毒 DNA 連接酶，它能夠高效催化相鄰的 DNA 核苷酸的連接，這個(gè)連接過程需要一條互補(bǔ)的 RNA 在兩條 DNA 單鏈間起“夾板”或“橋梁”的固定作用。PBCV DNA 連接 酶的這種活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)的 T4 DNA 連接酶，有助于 miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs 在內(nèi)的研究方法的創(chuàng)新。 另外，在二代測序和分子診斷等眾多領(lǐng)域中，PBCV DNA 連接酶是富集目的基因的理想選擇。它具有穩(wěn)定的生物活 性，對(duì) RNA 介導(dǎo)固定的 DNA 底物親和性強(qiáng)（米氏常數(shù) Km = 1 nM），能夠在復(fù)雜的混合物中檢測到亞納摩爾級(jí)的特 定 RNA。因此，在 RNA 檢測技術(shù)中，PBCV DNA 連接酶 不失為最佳選擇用酶。
儲(chǔ)存：-20℃可保存 2 年。
10×PBCV Ligase Buffer：500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM
MgCl2, 25 mM DTT, 5 mM ATP.
活性定義：25°C 反應(yīng) 30 分鐘條件下，使 1pmol 的
DNA:RNA 雜交底物連接所需要的酶量定義為 1Unit。
反應(yīng)溫度及失活該酶的最佳反應(yīng)溫度為 25°C，可在 16-37°C 之間優(yōu)化，37℃可明顯提高反應(yīng)的特異性；該酶在 65°C 加熱 20min 即可失活。
使用方法
1. 連接反應(yīng)
連接底物（1 μM） 2 μl
10×PBCV Ligase Buffer 2 μl
PBCV DNA Ligase(25 U/μl) 1 μl
滅菌水 up to 20 μl
25°C 反應(yīng) 15-60min。
2. 65°C 加熱 20min，使酶失活。
注意事項(xiàng)
1.該酶對(duì)一價(jià)陽離子非常敏感，如 NaCl 或 KCl 的濃度應(yīng)低于 50 mM。
2. 該酶的反應(yīng)溫度為16~37°C，最佳溫度為25℃。
3. 連接效率隨著夾板 RNA 長度的減少而降低，當(dāng)長度小于等于 10nt 時(shí)，連接效率為零。
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資料/datasheet
