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商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
凍干品Benzonase核酸酶
100KU
A-PJ1134
描述:
Benzonase 核酸酶是來自 Serratia marcescens, 經(jīng)基因工程改進(jìn)的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式(包括單鏈, 雙鏈,線性和環(huán)狀)的 DNA 和 RNA 而沒有蛋白裂解活性, 在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸完全消化成3-5 堿基長(zhǎng)度(雜交限度以下)的 5’-單磷酸寡核苷酸,最適合從重級(jí)蛋白中去除核酸的操作,符合 FDA 關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量的最佳選擇。 單位定義:在 30 分鐘內(nèi)使△ A260 值降低 1.0(相當(dāng)于完全消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。 注意:含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品,對(duì)該酶有部分抑制作用,使用時(shí)需要增加酶的用量。 應(yīng)用 蛋白提取時(shí)去除核酸污染 2D 凝膠電泳 Western Blot IP- Western 儲(chǔ)存:本品為凍干品形式,在凍干品未溶解狀態(tài)下,可置于 -20°C 長(zhǎng)期保存,可以室溫保存 1 個(gè)月,因此可在室溫條件下運(yùn)輸。 溶解:本品可使用 400 μl 的 ddH2O 溶解,溶解后該酶的濃度為 250U/μl。使用 ddH2O 溶解后的制品可在-20°C 保存 3個(gè)月,長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-60°C 以下。本品亦可使用 400 μl 的20%甘油溶解,溶解后的制品可在-20°C 條件下保存 2 年。 操作方法 1. 組織處理方法:將 30-50mg 動(dòng)植物組織研磨充分后,加入 100-200 μl RIPA 裂解液(,C2501),同時(shí)加入溶解后的 1 μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。 2. 細(xì)胞處理方法:將 106-107 懸浮細(xì)胞液 6,000 rpm 離心10min 后,棄掉上清液,使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細(xì)胞,同時(shí)加入溶解后的 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。 注意:貼壁細(xì)胞重懸于 PBS 后,處理方法同懸浮細(xì)胞。 3. 大腸桿菌細(xì)胞處理:將 500 μl E.coli 培養(yǎng)液 8,000rpm 離心 5min 后,棄掉上清液,使用 100 μl 大腸桿菌裂解液(,C2301)重懸細(xì)胞,同時(shí)加入溶解后的 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。 4. 裂解步驟完成后,將裂解產(chǎn)物于 13,000 rpm 離心 10min后,取上清即為提取蛋白(包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白)。 5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒(,C3001)測(cè)定蛋白濃度。
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