01.檢測目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中25羥基維生素D(25(OH)D)含量。
02.實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠25羥基維生素D(25(OH)D)水平。用純化的大鼠25羥基維生素D(25(OH)D)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入25羥基維生素D(25(OH)D),再與HRP標記的25羥基維生素D(25(OH)D)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的25羥基維生素D(25(OH)D)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠25羥基維生素D(25(OH)D)濃度。
03.試劑盒組成:




07.注意事項:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
08.計算數(shù)據(jù):
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
09.檢測范圍:
0.6ng/ml - 20ng/ml
10.保存條件及有效期:
1.試劑盒保存: 2-8℃。
2.有效期: 6個月