上個月，于濟(jì)南高新區(qū)，于一家生物檢測實(shí)驗室里，老張那般性情急烈之人，幾乎要被一個名為“紫外法生化試劑盒”的物品急得忍不住罵娘了。
有個叫老張的朋友，我是在行業(yè)交流會上結(jié)識他的，這老張從事試劑研發(fā)崗位長達(dá)七年之久，現(xiàn)階段擔(dān)任著一家第三方檢測機(jī)構(gòu)的技術(shù)負(fù)責(zé)人一職，在他負(fù)責(zé)的相應(yīng)項目范圍之內(nèi)，針對生化指標(biāo)展開的檢測量是最為龐大的，每一天要運(yùn)作幾十個樣本，等整個流程結(jié)束之后，試劑的消耗情況如同流水一般持續(xù)不斷。
他往昔始終采用傳統(tǒng)的可見光比色法的試劑盒，其操作極為繁雜，干擾眾多，并且結(jié)果還不穩(wěn)定。去年年末的時候，他聽聞同行提及紫外法生化試劑盒有靈敏度頗高、線性范圍寬廣的特性，于是便興致勃勃地更換了一批。然而使用還未滿半個月，問題便出現(xiàn)了。
用紫外法試劑盒總是測不準(zhǔn)怎么辦
老張那天下午給我打電話，語氣里全是火氣。
有著同樣的樣本，于上午對其進(jìn)行測量，在下午再次對其展開測量，最終所呈現(xiàn)的結(jié)果竟然相差了百分之二十。你說說這般情況讓我究竟該以怎樣的方式去跟客戶提交報告呢？
他講，試劑盒說明書當(dāng)中寫明穩(wěn)定性良好，然而實(shí)際運(yùn)用時，每次開啟機(jī)器都必須重新進(jìn)行校準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線也老是出現(xiàn)變化。他們實(shí)驗室里幾個技術(shù)員輪流開展操作，每一個人做出來的結(jié)果都并非十分相同。
我問他：“你用的紫外法試劑盒，配套的儀器條件調(diào)過沒有？”
他當(dāng)時愣了一下，隨后表示并沒有太在意這個情況，只是單純覺得試劑盒屬于標(biāo)準(zhǔn)品，所以直接拿去上機(jī)就可以了。
這兒便是問題所在之處。紫外法對于波長的準(zhǔn)確程度、光路的潔凈狀況、反應(yīng)的溫度條件均極為敏感。僅僅一味地關(guān)注著試劑盒自身，卻忘卻了儀器同樣需要跟上進(jìn)度，這乃是諸多實(shí)驗室陷入困境的所在之地。
紫外法生化試劑盒用之前到底要不要稀釋
老張后來靜下心，把整個流程捋了一遍。
他察覺到，他們實(shí)驗室所使用的紫外法試劑盒，其說明書之中寫明的是“直接加樣”，然而樣本的濃度呈現(xiàn)出極大的波動情況。對于高濃度樣本而言，倘若不進(jìn)行稀釋便直接上機(jī)，那么反應(yīng)體系里的底物會出現(xiàn)過快消耗情況，進(jìn)而致使反應(yīng)無法完全進(jìn)行，最終結(jié)果自然而然就會偏低。
低濃度的樣本，加樣量過少以致吸光度變化很微弱，儀器自身的噪聲將信號給淹沒掉了。
“你這不是試劑盒的問題，是樣本前處理沒跟上?！蔽腋f。
老張這才察覺到，紫外法生化試劑盒雖說靈敏度頗高，然而同樣勢必需要依據(jù)樣本濃度靈活可變地去調(diào)整稀釋倍數(shù)。他再度制定了操作規(guī)范，每個樣本來臨之前先行開展預(yù)稀釋梯度測試，確定最為適宜的加樣量。
結(jié)果出來后，重復(fù)性從原來的百分之十幾降到了百分之三以內(nèi)。
紫外法生化試劑盒保存不當(dāng)會有什么后果
解決了操作問題，老張以為萬事大吉了。可到了月底，又出事了。
此次是試劑盒自身出現(xiàn)了問題，有一批新近抵達(dá)的、采用紫外法的生化試劑盒，開箱以后按照說明書提出的要求，在二至八攝氏度的環(huán)境下進(jìn)行冷藏保存，然而使用了三天。試劑的顏色就發(fā)生了變深的狀況，反應(yīng)曲線也呈現(xiàn)出不對勁的情形。
老張經(jīng)過一番冷鏈記錄的查看以后才知曉，這批做實(shí)驗用的試劑在通過物流運(yùn)輸?shù)倪^程當(dāng)中，有一段時期的溫度記錄呈現(xiàn)出超過了15度的情況，這種超越的狀態(tài)持續(xù)了四個小時。
我提醒他，紫外法試劑盒當(dāng)中的某些成分，對于溫度格外敏感，特別是NADH、NADPH這些輔酶，一旦溫度升高，降解速度就會變快，快到明顯的程度。
老張趕忙聯(lián)系供應(yīng)商，更換了一趟冷鏈運(yùn)輸?shù)呢浳?，并且要求?shí)驗室里，任何一個試劑盒在開箱之后，都要進(jìn)行一次質(zhì)控品驗證，在確認(rèn)沒有問題之后方可使用。
從那以后，他的實(shí)驗室再沒因為試劑保存問題出過岔子。
紫外法生化試劑盒的波長選擇有多重要
今年三月份的時候，我?guī)е蠌埲⑴c了一場生化檢測技術(shù)沙龍。在那個臺上，有一位資深專家講述了一個案例：某個實(shí)驗室運(yùn)用紫外法來測定乳酸脫氫酶，一直都沒辦法做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，折騰了長達(dá)兩個月的時間，最終才發(fā)現(xiàn)原來是波長設(shè)置錯誤了。
紫外法試劑盒進(jìn)行測定時，其波長通常處于340納米的大致范圍，不過不同廠家生產(chǎn)的，并且針對不同指標(biāo)的此類試劑盒，會存在細(xì)微差別。要是儀器的波長沒有經(jīng)過校準(zhǔn)，又或者是操作員依據(jù)自身經(jīng)驗選用了其他波長，那么最終得出的結(jié)果，偏差將會極大。
張氏聽到之后立即拿出手機(jī)，朝著實(shí)驗室撥打電話，要求他們將全部紫外分光光度計的波長再次校準(zhǔn)一回。
回來以后，他向我發(fā)出感慨，說道：“先前認(rèn)為生化試劑盒不過是個傻瓜式的工具，只要進(jìn)行加樣操作，再去進(jìn)行讀數(shù)，然后就可以得出結(jié)果。然而如今才明白，像紫外法這樣的技術(shù)，其細(xì)節(jié)豐富到能夠?qū)懗鲆槐緯鴣怼！薄?/p>
他特意組織了一回內(nèi)部培訓(xùn)，將波長校準(zhǔn)環(huán)節(jié)過了一遍，又把溫度控制環(huán)節(jié)過了一遍，還把樣本稀釋環(huán)節(jié)過了一遍，再把冷鏈保存環(huán)節(jié)過了一遍。培訓(xùn)結(jié)束之后，實(shí)驗室里每個人都會背誦“紫外四要素”。
用對紫外法生化試劑盒之后，老張的實(shí)驗室怎么樣了
上一周，我再度去往老張所處的實(shí)驗室了，其時，他正端坐在電腦跟前，看著那份報告，其臉上已沒了幾個月之前所呈現(xiàn)出的焦慮神情。
他向我展示了最近一個季度的數(shù)據(jù)，其中紫外法生化試劑盒的檢測重復(fù)性穩(wěn)定狀況處于百分之二以內(nèi)，和第三方比對所獲結(jié)果的一致性達(dá)成百分之九十八以上，客戶投訴率從百分之五降低至接近零。
老張笑著說道，以前他覺得試劑盒不太好用，然而現(xiàn)如今他發(fā)現(xiàn)原來是自己沒有完全摸透它的脾性。
他所擁有的經(jīng)驗實(shí)則僅有一條，那便是紫外法生化試劑盒屬于一種良好的工具，然而它針對操作細(xì)節(jié)所提出的要求顯著高于傳統(tǒng)方法，儀器需要進(jìn)行校準(zhǔn)，樣本需要實(shí)施預(yù)處理，保存必須嚴(yán)加要求，波長需要予以確認(rèn)，這些環(huán)節(jié)緊密相連，缺少任何一環(huán)都是不可以的。
老張目前已然成為了他們那個公司內(nèi)部的技術(shù)顧問，專門去協(xié)助別的實(shí)驗室對紫外法試劑盒的使用流程予以優(yōu)化 ， 他時常會講出這樣一句話：“ 在著急怪罪試劑盒之前 ， 先瞧瞧自己是不是把它照料妥善了。 ”。
這話糙，但理不糙。
