為什么我今天要寫這篇文章
做實驗之人最怕啥呢? 怕數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確, 怕進行重復(fù)勞作, 怕浪費耽擱時間。倘若你正為生化檢測的精準(zhǔn)度以及效率而發(fā)愁, 那么這篇文章說不定能夠助你少走數(shù)月的冤枉路。我的友人老陳, 從事生化試劑開發(fā)長達十二年之久, 其近來運用紫外法試劑盒的經(jīng)歷, 令我覺得有必要將其撰寫出來。
老陳是誰，他在做什么
老陳是技術(shù)方面的負(fù)責(zé)人, 三年前跳槽到一家生物科技公司。他主要圍繞食品和飼料, 所做之事為其中生化指標(biāo)的檢測。他帶領(lǐng)著一個十人團隊, 平日與之打交道最多物件為紫外分光光度計以及各式試劑盒。行業(yè)范圍之內(nèi), 所有人都知曉他此人, 他有追求極致準(zhǔn)確的特點, 一旦數(shù)據(jù)存在些許偏差, 他會追查直至水落石出。
讓我頭疼的紫外法到底行不行
去年十二月, 老陳接到了一個緊急項目, 這個項目是要開發(fā)一批用于檢測飼料中還原糖含量的試劑盒, 傳統(tǒng)的比色法盡管成熟, 然而操作步驟繁多, 還容易受到樣品顏色的干擾, 老陳跟團隊討論過后, 決定去嘗試紫外法, 這是因為紫外法對于還原糖的檢測具備更高的靈敏度以及特異性。
紫外法試劑盒的優(yōu)勢在哪里
老陳跟我講, 紫外法試劑盒最為突出的優(yōu)勢在于能夠徑直對物質(zhì)在特定波長情形下的吸光度予以檢測, 并不需要進行額外的顯色反應(yīng)。如此一來, 既將顯色的步驟給省略掉了, 又躲開了因樣品自身顏色所引發(fā)的誤差。就如同檢測蛋白質(zhì)、核酸等成分的時候, 紫外法相較于傳統(tǒng)方法要快二十分鐘, 并且結(jié)果更為穩(wěn)定。
紫外法試劑盒真的靠譜嗎
最開始的時候，老陳所在的團隊所使用的試劑盒子, 乃是在市面上能夠買到的一款進口的、采用紫外法的產(chǎn)品, 該產(chǎn)品標(biāo)稱其精度是非常高的。然而, 在進行了三批樣品的檢測操作之后, 老陳察覺到了這樣一個情況, 那就是同一個樣品在不同日期所得到的檢測結(jié)果, 竟然相差了百分之五。而這一狀況, 對于有著嚴(yán)格要求的飼料檢驗工作來講, 那完全是沒辦法被接受的。就在那段日子里, 加班到凌晨時分的情況對于老陳來說是極為頻繁的, 他不斷地反復(fù)去排查究竟是儀器方面出現(xiàn)了問題, 還是試劑盒自身存在著問題。
紫外法試劑盒使用中的細節(jié)問題
老陳在進行經(jīng)驗總結(jié)之際講道, 紫外法試劑盒就操作環(huán)境而言有著相對較高的要求, 舉例來說, 于檢測之時, 要是樣品之中存在氣泡, 又或者比色皿帶有劃痕, 那么均會對紫外光的穿透造成影響, 致使吸光度出現(xiàn)偏高或者偏低的狀況, 除此之外, 試劑盒的保存溫度同樣至關(guān)重要, 一旦超出四至八度的范圍, 酶活便有可能下降, 反應(yīng)也就不會全然完成。
怎么選擇靠譜的紫外法試劑盒
那次波折過后, 老陳著手自行評估供應(yīng)商, 他歸納出幾條經(jīng)驗: 其一, 查看試劑盒的酶穩(wěn)定性測試報告時, 并非僅看其出廠數(shù)據(jù), 而是得看模擬運輸以及儲存之后的數(shù)據(jù)；其二, 需親自去跑標(biāo)準(zhǔn)曲線, 瞧瞧線性狀況如何, R 方值起碼要處于 0.995 以上；其三, 要問明白適用的樣品類型, 因為有些紫外法試劑盒在復(fù)雜基質(zhì)里干擾頗為大。
紫外法試劑盒的穩(wěn)定性檢驗方法
今年三月, 老陳尋得一款國產(chǎn)紫外法試劑盒, 廠家稱曾做過多批次驗證。老陳親率團隊開展為期兩周的穩(wěn)定性測試, 每日測三次, 記錄同一樣品吸光度之變化。結(jié)果顯示, 此試劑盒批間差控制于百分之二以內(nèi), 全然達其要求。自那之后, 老陳項目推進速度大幅加快。
紫外法試劑盒能替代傳統(tǒng)方法嗎
此刻, 老陳所在的團隊, 已將紫外法試劑盒應(yīng)用于三項常規(guī)檢測項目內(nèi), 這三項項目, 涵蓋還原糖檢測、總蛋白檢測以及特定酶活檢測。由此, 他得出這樣的結(jié)論: 若要使紫外法試劑盒在特定指標(biāo)方面能夠徹底取代傳統(tǒng)方法, 其前提條件是, 必須選對產(chǎn)品, 同時, 還要用對條件。舉例來講, 針對顏色極深的樣品, 紫外法相較于比色法, 反而更為精準(zhǔn), 緣由在于, 采用紫外法時, 無需擔(dān)憂顏色干擾問題。
實際應(yīng)用中紫外法試劑盒的常見錯誤
老陳向我提示, 好多人使用紫外法試劑盒時極易犯下一個失誤, 那就是: 樣品未進行空白對照。紫外法對于背景吸收極為敏感, 要是未使用恰當(dāng)?shù)目瞻滓赫{(diào)零, 結(jié)果定會出現(xiàn)極大偏差。他所在團隊如今每次開展實驗以前, 都會先以超純水調(diào)零, 接著再用樣品溶劑做一回空白, 以此保證基線穩(wěn)定。
紫外法試劑盒操作時的溫度控制
當(dāng)中還有一個細節(jié)是溫度, 老陳有所發(fā)現(xiàn), 在檢測之際, 要是樣品的溫度處于不穩(wěn)定的情形狀況下, 那么紫外吸收值就會長存漂移的現(xiàn)象發(fā)生, 就好比是從冰箱之中取出的樣品直接進行上機操作, 吸光度會于幾分鐘之內(nèi)緩緩地產(chǎn)生變化, 而他們當(dāng)下所采用的做法是，先將樣品放置于二十五度的水浴里進行平衡五分鐘, 之后才著手剛開始檢測, 就是這樣一個簡單的改動, 促使重復(fù)性提升了大約三分之一。
紫外法試劑盒未來的發(fā)展趨勢
老陳持有這樣的看法, 那就是, 伴隨檢測精確程度要求持續(xù)提升, 紫外法試劑盒將會越發(fā)廣泛地得到應(yīng)用。特別是在那些有著快速篩查需求的情形之下, 像是飼料廠、食品廠的現(xiàn)場品質(zhì)把控方面, 紫外法試劑盒能夠顯著縮短檢測所需要的時長。他近期一直在跟廠家進行交流, 期望研制出一種能夠同時對多個指標(biāo)展開檢測的紫外法試劑盒, 即一個樣品經(jīng)過一次檢測流程便能夠得出多個數(shù)據(jù)。
寫在最后
我從老陳講的故事中了解到, 紫外法試劑盒并非無所不能的神奇藥物, 然而倘若運用得當(dāng)那絕對是化驗室里極為厲害的工具。重點在于弄明白其中的原理, 把控好各個細節(jié), 挑選到合適的產(chǎn)品。要是你此刻正為檢測效率而煩惱, 不妨仔細深入地探究一番紫外法試劑盒, 它說不定正是你一直尋覓的解決辦法。
