朋友老張的“翻車”經(jīng)歷
上個(gè)月，老張差點(diǎn)把他的實(shí)驗(yàn)記錄本摔在地上。
我認(rèn)識(shí)長達(dá)五年之久作為朋友名為老張之人, 于一家生物性質(zhì)公司的研發(fā)部門擔(dān)任項(xiàng)目主管之職位, 其主要所從事工作任務(wù)乃是進(jìn)行蛋白標(biāo)志物的檢測以及篩選相關(guān)事宜。他在做事方面向來具備穩(wěn)當(dāng)?shù)奶匦? 但最近達(dá)半年的時(shí)間段里, 他手下所產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)始終呈現(xiàn)出不正常的狀態(tài), 即針對(duì)同一個(gè)樣品而言, 三次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)跑出來的OD值竟然能夠相差出將近20%的幅度。
他于電話中跟我吐槽, 說這東西要是拿去給客戶瞧, 人家必定會(huì)罵他造假, 其語氣里有著一種既無奈又焦躁的疲憊。我那時(shí)沒多作思考, 僅僅是當(dāng)作實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)了差錯(cuò), 一直到上周末他邀約我出去就餐, 才將整件事情的前因后果講述明白。
有那么一頓飯的時(shí)間, 我自始至終都在聽, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)他所遭遇的那些問題, 幾乎是每一個(gè)從事科研ELISA試劑盒工作的人都會(huì)碰到的情況。之后我把他的那段經(jīng)歷認(rèn)認(rèn)真真地寫了下來, 滿心期望能夠讓讀到這篇文章的你, 在相關(guān)路途方面能夠少經(jīng)歷一些曲折。
為什么科研ELISA試劑盒的數(shù)據(jù)總是不穩(wěn)定？
最開始被老張懷疑的是操作手法, 他讓團(tuán)隊(duì)之中的兩個(gè)技術(shù)員各自復(fù)測同一批樣本, 嚴(yán)格依據(jù)說明書去做, 然而兩個(gè)人的數(shù)據(jù)依舊對(duì)不上, 一個(gè)偏高, 一個(gè)偏低, 彼此誰都不服誰。
老張表示, 當(dāng)時(shí)自己就處于一種懵掉的狀態(tài), 自己進(jìn)行了長達(dá)八年時(shí)間的實(shí)驗(yàn), 在這第一回的時(shí)候, 竟感覺自己沒辦法去做ELISA了。
之后他才發(fā)覺, 問題的關(guān)鍵并非在于操作, 而是存在于試劑盒自身。他先前一直所使用的是某一家小型工廠生產(chǎn)的試劑盒, 其價(jià)格的確較為便宜, 然而不一樣批次之間的穩(wěn)定性乃是特別差的。同一貨號(hào)在不同批次的試劑盒當(dāng)中, 抗體效價(jià)能夠相差出一倍之多。
這實(shí)際上是一種頗為隱秘的陷阱, 眾多從事科研工作的人, 特別是那些預(yù)算并不寬裕的研究生以及初創(chuàng)團(tuán)隊(duì), 常常會(huì)受到低價(jià)的吸引, 然而科研 ELISA 試劑盒的關(guān)鍵并非在于價(jià)格低廉, 而是在于重復(fù)性以及一致性, 要是你的數(shù)據(jù)無法重復(fù), 那么后續(xù)的發(fā)表文章、申報(bào)項(xiàng)目以及進(jìn)行轉(zhuǎn)化, 均會(huì)被直接一票否決。
怎么判斷科研ELISA試劑盒的質(zhì)量好不好？
兩個(gè)星期之后, 老張把市面上主流的那幾個(gè)品牌都買回來, 進(jìn)行對(duì)比測試。他總結(jié)出來了三個(gè)判斷標(biāo)準(zhǔn), 我認(rèn)為特別實(shí)用。
核查批間差, 品質(zhì)優(yōu)良的試劑盒會(huì)于說明書之中明確標(biāo)注批間差的CV數(shù)值, 該數(shù)值通常條件下需小于百分之十, 要是說明書僅僅闡述批內(nèi)差, 對(duì)于批間差未有提及, 那就需要謹(jǐn)慎留意了。
查閱回收率情況, 選取已知確定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品, 借助試劑盒予以測量, 觀察實(shí)際測量所得數(shù)值與理論數(shù)值之間的差別, 真正具備可靠性的試劑盒是何種狀況, 回收率理應(yīng)處于90%至110%的范圍區(qū)間吶 , 老張所檢測的那一批來自小廠生產(chǎn)的貨品, 其回收率僅僅只有70%多一點(diǎn)。
審視線性范圍, 存在這樣的情況, 部分試劑盒所標(biāo)稱的檢測范圍極為寬泛, 然而在實(shí)際操作中, 于低濃度區(qū)域信號(hào)呈現(xiàn)出極其微弱的態(tài)勢, 并且背景噪聲卻又處在較高水平, 以至于根本無法得以使用。老張給出建議, 優(yōu)先去開展一次進(jìn)行梯度稀釋的預(yù)實(shí)驗(yàn), 以此來查看標(biāo)準(zhǔn)曲線是否呈現(xiàn)為平滑的S形。
這話是老張說的, 當(dāng)時(shí)他正用筷子夾著菜, 表情終于沒那么擰巴了, 他說自己后來換了一個(gè)有資質(zhì)的大廠供貨, 別的暫且不說, 至少每次下單時(shí)那種穩(wěn)定感能讓自己心里踏實(shí)。
實(shí)驗(yàn)失敗后的補(bǔ)救方法，這幾個(gè)步驟很關(guān)鍵
老張將第一批問題數(shù)據(jù)全都給廢棄掉了, 那可是他耗費(fèi)一個(gè)月所收獲的勞動(dòng)戰(zhàn)果, 居然說扔就直接扔掉了, 致使團(tuán)隊(duì)的士氣在那段時(shí)間一度變得很低落。
他沒有馬上重新去采購試劑盒, 而是先做了一件事, 這件事就是復(fù)盤。他把往日所有的實(shí)驗(yàn)記錄都翻找出來, 一項(xiàng)一項(xiàng)去排查, 排查這孵育溫度是不是恒定的? 看這洗板次數(shù)是不是一致的? 查這顯色時(shí)間是不是精確的? 最終發(fā)現(xiàn), 有一個(gè)技術(shù)員習(xí)慣在室溫狀態(tài)下孵育, 而另一個(gè)技術(shù)員習(xí)慣借助 37 度的恒溫箱進(jìn)行孵育, 這兩個(gè)條件之間存在的差異足夠致使結(jié)果產(chǎn)生系統(tǒng)性的偏差。
老張說, 好多時(shí)候, 試劑盒自身不存在問題, 是人的操作習(xí)慣將問題給放大了。
他對(duì)標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行了重新制定, 把每一步狀況下的條件予以固化, 乃是采用相同的孵育溫度, 運(yùn)用同樣的洗板機(jī)以及同樣的讀板時(shí)間。隨后, 他針對(duì)新買的科研 ELISA 試劑盒再度開展了一次預(yù)實(shí)驗(yàn), 在這一回, 數(shù)據(jù)所呈現(xiàn)出的穩(wěn)定性顯著得以好轉(zhuǎn), CV 值降低至 5%以內(nèi)。
所以, 要是你此刻也碰到了數(shù)據(jù)不穩(wěn)定的狀況, 別著急去責(zé)罵試劑盒。先去仔細(xì)排查自身的操作流程, 接著再對(duì)比試劑盒的質(zhì)量。這兩步都落到實(shí)處了，問題基本上就能夠得以解決。
小實(shí)驗(yàn)室怎么選科研ELISA試劑盒才不踩坑？
老張所在團(tuán)隊(duì)規(guī)模不算大, 預(yù)算也并不寬裕, 他在采購新試劑盒之際, 遭遇了一個(gè)頗為現(xiàn)實(shí)的難題, 大品牌產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)良, 不過價(jià)格高昂, 小實(shí)驗(yàn)室無力購買, 小品牌價(jià)格低廉, 然則質(zhì)量缺乏保障。
他最后是怎么破局的呢？
他尋得了一家于行業(yè)之中具備一定口碑然而并非處于一線陣勢的品牌, 率先索要了一批試用裝, 對(duì)方極為爽快地予以了, 并且還額外附帶了完整的COA（分析證書）, 老張憑借這批試用裝開展了三次獨(dú)立重復(fù)的實(shí)驗(yàn), 在確認(rèn)數(shù)據(jù)處于穩(wěn)定狀態(tài)之后, 方才下定決心進(jìn)行批量采購。
絕不能夠因貪圖便宜而行動(dòng), 也不可以盲目地去追求大牌。最為契合小實(shí)驗(yàn)室情形的那種辦法其實(shí)是: 先展開試用這種行為, 之后再討論價(jià)格的相關(guān)事宜。老張做出了如此的總結(jié)。
對(duì)此他給出建議, 采購之際務(wù)必要問明白售后支持的相關(guān)情況。優(yōu)秀良好的供應(yīng)商會(huì)給予技術(shù)方面的支撐, 甚至于能夠協(xié)助你去優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案。而那些售賣完成之后便不再理會(huì)你的供應(yīng)商, 即便其價(jià)格極為便宜, 也千萬不要去接觸。
科研ELISA試劑盒的保存和有效期，很多人都搞錯(cuò)了
在這之前, 老張對(duì)于這樣一個(gè)問題從未將其放置于心上, 他養(yǎng)就的習(xí)慣是把試劑盒徑直朝著4度的冰箱里面一塞, 等到需要使用的時(shí)候再從中取出來, 一直到有一回, 他察覺到一盒尚未開封的試劑盒竟然出現(xiàn)了沉淀這種情況, 這才認(rèn)識(shí)到保存的方法存在相應(yīng)的問題。
做法正確的是, 對(duì)于未開封的試劑盒, 需嚴(yán)格依照說明書所推薦的溫度來進(jìn)行保存, 其中多數(shù)情況為4度, 然而存在一些具有特殊靶標(biāo)的試劑盒則需要在-20度的環(huán)境下進(jìn)行凍存。對(duì)于已經(jīng)開封的試劑盒, 其里面所含的抗體以及酶標(biāo)液要在分裝之后才能夠冷凍保存, 目的是避免出現(xiàn)反復(fù)凍融的情況。
后來, 老張?jiān)谧约旱膶?shí)驗(yàn)室貼了一張表, 表上列有每個(gè)試劑盒的貨號(hào), 還有批號(hào), 以及開盒日期, 甚至有效期, 他每周會(huì)檢查一次。他講, 不少人覺得試劑盒過了標(biāo)稱有效期便不能用了, 可實(shí)際上只要保存妥當(dāng), 多數(shù)試劑盒在有效期后一個(gè)月內(nèi)依舊能夠保持良好的活性, 不過前提是你要事先做過穩(wěn)定性驗(yàn)證。
他面帶笑容地講, 別拿著你的實(shí)驗(yàn)去做賭注, 我曾經(jīng)有過一次賭輸?shù)慕?jīng)歷, 自此之后是再也不敢去進(jìn)行賭博這般行為了。
從翻車到救車，老張的轉(zhuǎn)變給了我什么啟示
現(xiàn)在老張擁有比兩個(gè)月前好了許多的心情, 他再次獲得了可靠的數(shù)據(jù), 項(xiàng)目進(jìn)度也追趕回來, 上個(gè)月份, 他所在的團(tuán)隊(duì)運(yùn)用新買的科研ELISA試劑盒完成了一整本臨床前樣本的檢測任務(wù), 最終得來的結(jié)果出色到讓客戶直接追加了訂單。
被他邀請(qǐng)去吃了一回火鍋, 吃飯期間他講了一句給我留下深刻印象的話語, 那便是, 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人, 最為懼怕的并非失敗, 而是不清楚之所以失敗的緣由。試劑盒僅僅是一種工具, 關(guān)鍵之處在于你是不是自身具備將其運(yùn)用好、把它選擇正確的能力。
令我極其深切地認(rèn)為這是對(duì)的。從事科研的這條道路, 不存在便捷的途徑, 然而能夠降低冤枉走的路。一篇質(zhì)量優(yōu)良的文章、一組值得信賴的數(shù)據(jù), 其背后常常是經(jīng)過一回回嘗試犯錯(cuò)后所做出的明智抉擇。要是你同樣正為酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒的挑選以及數(shù)據(jù)穩(wěn)定性而苦惱, 不妨將老張的故事當(dāng)作一面鏡子, 映照一下自己當(dāng)下正處于哪一個(gè)階段。
希望下一次，你也能從翻車變成救車。
