我結(jié)識(shí)了一位名為老周的朋友, 他于華東地區(qū)的一家生物科技公司擔(dān)任研發(fā)主管, 其職責(zé)是負(fù)責(zé)分子診斷產(chǎn)品的開發(fā)。我倆相識(shí)將近十年, 他這人在做事之際格外較真, 每當(dāng)挑選試劑盒時(shí)都會(huì)進(jìn)行反復(fù)對(duì)比, 簡(jiǎn)直是渴望將每一項(xiàng)技術(shù)參數(shù)都徹底弄明白。
今年三月初的時(shí)候, 老周突然在微信上面找我去吐槽, 講他最近因?yàn)镻CR定量試劑盒的選型方面的問題, 被弄得到了焦頭爛額的地步。他們的公司剛剛承接了一個(gè)大的項(xiàng)目, 這個(gè)項(xiàng)目是要去開發(fā)一款針對(duì)呼吸道病原體的多重檢測(cè)產(chǎn)品出來, 時(shí)間非常緊迫, 任務(wù)也很繁重, 可不巧的是, 恰恰是在核心原料, 也就是定量試劑盒的選擇上面出現(xiàn)了阻礙。
選擇PCR定量試劑盒有多難？
有個(gè)叫老周的人, 其所在的公司于生物醫(yī)藥這個(gè)行業(yè)范疇里, 算得上是處于中等規(guī)模的狀態(tài), 在此之前, 一直是運(yùn)用進(jìn)口的定量試劑盒, 這情形, 成本高暫且不表, 就連供貨周期也是比較長(zhǎng)的那種情況。在今年年初的時(shí)候, 公司的高層明確地提出了對(duì)控制成本的要求, 期望老周所在的部門能夠盡快地尋覓到具備更高性價(jià)比的國產(chǎn)替代方案。
剛開始的時(shí)候, 老周認(rèn)為這件事情并非具有難度, 在市場(chǎng)之上, 從事生產(chǎn)PCR定量試劑盒的廠家數(shù)量眾多, 從中挑選幾家實(shí)施試用此即可。然而，當(dāng)真正著手開展這件事情之后, 才發(fā)覺, 實(shí)際情況遠(yuǎn)比預(yù)先所想象的要復(fù)雜得多。
他花費(fèi)兩周光陰之所, 經(jīng)由不同途徑獲取七八個(gè)品牌的定量試劑盒樣本 , 這些樣本包含國內(nèi)主流廠家的產(chǎn)品。而后他依據(jù)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)流程, 逐個(gè)檢測(cè)這些試劑盒的靈敏度 , 與特異性 , 還有重復(fù)性。
結(jié)果致使令人頭疼不已, 每個(gè)試劑盒自身具備不一樣的優(yōu)點(diǎn)以及缺點(diǎn), 存在一種情況為靈敏度較高然而重復(fù)性欠佳, 另外存在一種情況是穩(wěn)定性良好可是擴(kuò)增效率較低。老周同團(tuán)隊(duì)成員持續(xù)不斷加班以作測(cè)試, 歷經(jīng)一個(gè)多月時(shí)間, 數(shù)據(jù)累積形成了厚厚的一疊, 最終竟然沒能尋覓到一款能夠全方面適應(yīng)他們項(xiàng)目相關(guān)需求的。
PCR定量試劑盒性能到底看什么指標(biāo)？
周老年中四月的一回周末, 邀我外出飲茶, 談及此事宜, 仍是滿臉愁緒。他跟我講, 實(shí)際上挑選PCR定量試劑盒的時(shí)候, 關(guān)鍵點(diǎn)要看三項(xiàng)指標(biāo), 分別是靈敏度, 線性范圍以及抗干擾能力。
檢測(cè)下限取決于靈敏度, 老周所負(fù)責(zé)項(xiàng)目對(duì)于核酸模板的檢測(cè)要求是每微升必須檢測(cè)到10個(gè)拷貝, 市面上多數(shù)試劑盒均可達(dá)成此項(xiàng)要求, 然而于現(xiàn)實(shí)條件下的樣本里其表現(xiàn)存在極大差異, 部分試劑盒于純化模板之時(shí)呈現(xiàn)較好情況, 可一旦遭遇復(fù)雜臨床樣本便顯露出原本不佳之狀。
線性范圍與定量準(zhǔn)確性有著直接的關(guān)聯(lián), 老周講道, 有一款他們所測(cè)試的試劑盒, 在低濃度的區(qū)間之內(nèi)誤差超出了15%, 而對(duì)于那些需要精準(zhǔn)判斷病原體載量的應(yīng)用場(chǎng)景而言, 這是根本無法接受的。
尤其是其抗干擾能力, 堪稱是硬傷所在。老周所獲取的樣本當(dāng)中, 時(shí)常會(huì)包含血液、黏液等各類干擾物質(zhì), 存在這樣的狀況, 部分試劑盒在這些條件之下, 擴(kuò)增效率顯著降低, 進(jìn)而致使出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
選用PCR定量試劑盒要注意哪些坑？
五月中旬時(shí), 老周所進(jìn)行的測(cè)試步入了白熱化的階段, 他同團(tuán)隊(duì)里的成員將選型的范圍縮減至三家, 針對(duì)每一家都實(shí)施了最少三輪的平行比對(duì)。
首個(gè)坑是批間穩(wěn)定性, 老周發(fā)覺, 就有一家公司的試劑盒而言, 不同批次中間 Ct 值起伏超出兩個(gè)循環(huán), 于實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中這會(huì)帶來嚴(yán)重的定量偏差。他們特意向廠家索要了三個(gè)批號(hào)的試劑盒來做對(duì)比測(cè)試, 其結(jié)果證實(shí)了他們內(nèi)心的擔(dān)憂。
第二個(gè)坑是引物探針兼容性, 老周的項(xiàng)目要同時(shí)檢測(cè)四個(gè)靶標(biāo), 這就使得試劑盒得具備良好的多重?cái)U(kuò)增性能, 有一家試劑盒在單重檢測(cè)時(shí)展現(xiàn)出突出表現(xiàn), 可一旦進(jìn)入多重體系, 非特異性擴(kuò)增顯著增多, 數(shù)據(jù)完全不堪入目。
第三個(gè)坑, 乃是冷鏈運(yùn)輸?shù)目煽啃? 老周跟我講, 他們?cè)?jīng)收過一批試劑盒, 只因運(yùn)輸途中溫度超出標(biāo)準(zhǔn), 酶的活性遭受嚴(yán)重?fù)p失, 整批試劑宣告作廢, 白白地浪費(fèi)了三天時(shí)間。
PCR定量試劑盒國產(chǎn)和進(jìn)口怎么權(quán)衡？
五月底的時(shí)候, 老周與團(tuán)隊(duì)終于是做出了決定, 他們最后挑選了一家國內(nèi)頭部企業(yè)的產(chǎn)品, 這家公司有著多個(gè)自主研發(fā)的核心酶專利, 其在行業(yè)里的口碑向來是不錯(cuò)的。
老周向我詳盡剖析了此選擇背后所蘊(yùn)含的邏輯, 進(jìn)口試劑盒盡管技術(shù)已然成熟, 穩(wěn)定性也頗為良好, 然而其價(jià)格卻是國產(chǎn)的二至三倍, 并且供貨周期漫長(zhǎng), 遭遇突發(fā)狀況時(shí)極難及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)貨, 最為關(guān)鍵之處在于, 進(jìn)口試劑盒的配方常常不予以公開, 一旦出現(xiàn)問題, 要進(jìn)行調(diào)整會(huì)相當(dāng)困難。
選的那款國產(chǎn)試劑盒, 兩個(gè)多月嚴(yán)格測(cè)試后, 靈敏度成每微升5個(gè)拷貝, 線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí), 抗干擾能力較出色。個(gè)別指標(biāo)和進(jìn)口產(chǎn)品有差距, 所涉項(xiàng)目應(yīng)用場(chǎng)景下完全夠用。
六月上旬, 老周借助這款試劑盒達(dá)成了首批樣本的驗(yàn)證檢測(cè), 成果極為理想。他特地發(fā)送消息告知我, 稱此選擇為公司節(jié)約了將近百分之四十的成本, 并且技術(shù)支持以及售后服務(wù)相較于進(jìn)口廠家都要及時(shí)許多。
前不久的那一回碰頭, 老周跟我講, 關(guān)于挑選PCR定量試劑盒這個(gè)事兒, 從表面上去看, 好似是在挑產(chǎn)品, 實(shí)則是在挑合作的伙伴。而一個(gè)可以信賴的供應(yīng)商, 不但能夠提供質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品, 而且還能在研發(fā)進(jìn)程當(dāng)中給予技術(shù)方面的支撐以及解決問題的方案, 這才是真正具有價(jià)值的地方。
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