木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
注意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。
測定原理
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?；笤?80nm處有特征吸收峰，280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。
需自備的儀器和用品、
天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機(jī)，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸，濃硫酸。
試劑組成和配制
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體100mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理
樣品80℃烘干至恒重，粉碎，過40目篩，稱取約2mg（記為W）于10mL玻璃試管中（務(wù)必用玻璃試管，不可用Ep管）
測定操作表
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空白管 |
測定管 |
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樣本（mg） |
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2 |
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試劑一（μL） |
500 |
500 |
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高氯酸（μL） |
20 |
20 |
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于10mL玻璃試管中，用封口膜密封，充分混勻，80℃水浴40min，每隔10min震蕩一次，然后自然冷卻 |
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試劑二（μL） |
500 |
500 |
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充分混勻 |
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上清（μL） |
20 |
20 |
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試劑三（μL） |
980（參照注意事項(xiàng)四） |
980（參照注意事項(xiàng)四） |
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取200μL于微量石英比色皿/96孔板，測定280nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A空白管和A測定管，ΔA=A測定管-A空白管 |
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計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0347x+0.0068，R2=0.9889
Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反總×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50
V反總：反應(yīng)總體積：1.02mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)
注意事項(xiàng)
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資料/datasheet
